Методи за изобразяване на светло-поле и тъмно-поле при флуоресцентна микроскопия
(1) Метод за изобразяване в светло поле (BFI), който позволява само предаваният електронен лъч в параксиалната област да премине през отвора на обектива, образувайки тъмно изображение на светъл фон. Колкото по-малък е отворът на обектива, толкова по-голям е контрастът на изображението в светло поле; (2) Изображението в тъмно поле (DFI) е техника, която позволява само част от разпръснатия лъч с голям ъгъл или определен дифракционен лъч на кристала да премине през отвора на обектива, като същевременно блокира предавания лъч. Това формира ярко графично изображение на тъмен фон. Този метод за изобразяване на тъмно поле може да подобри контраста на изображенията и е важна техника за изобразяване.
Има приблизително четири метода за постигане на изображения в тъмно поле с помощта на флуоресцентни микроскопи Leica: (1) поддържане на вертикално осветление по оптичната ос, докато се движи апертурата на обектива; (2) Използването на наклонено осветяване за улавяне на разпръснати лъчи по посока на оптичната ос се нарича изобразяване на централно тъмно поле (CDFI); (3) Апертура на обектива с централен ограничител на лъча и кръгла прозрачна зона; (4) Използвайте кръгла прозрачна събирателна леща за светлоусещане и централна кръгла бленда за лещата на обектива. * Методът тук е най-простият, но той използва електронно изображение в дисталната област на ръкава, така че аберацията е голяма и качеството на изображението не е много добро. Вторият метод може да избегне горните недостатъци, но апертурата на обектива на флуоресцентния микроскоп Leica получава само малка част от разпръснати дифрактирани електрони, което води до по-ниска ефективност. Страната на блендата често е подложена на голямо количество електронно бомбардиране, което може лесно да причини асиметрично замърсяване и да повлияе на качеството на изображението. Пръстенообразната леща на обектива е подобрена в този аспект, но недостатъкът е, че е трудно да се произвежда и е трудно да се постигне пълна аксиална симетрия. Като се имат предвид относително облекчените изисквания за осветителната система, последното решение може да бъде прието, което включва добавяне на пръстеновиден отвор в кондензатора, за да се осигури осветяване с кух лъч за пробата. Ефектът от това устройство. Неговата разделителна способност на изображението може да бъде близка до тази на изображенията в светло поле, докато контрастът е значително подобрен.
