Какво е микроскопия в тъмно поле? Колко малка може да се види една клетка?
Микроскопът с тъмно поле е вид оптичен микроскоп, наричан още ултрамикроскоп. В центъра на кондензатора на микроскоп с тъмно поле има светлинен щит, така че осветителната светлина да не навлиза директно в човешката леща. Само светлината, отразена и дифрактирана от образеца, може да влезе в лещата на обектива. Поради това фонът на зрителното поле е черен, а краищата на обектите са светли. на. Този вид микроскоп може да види частици с размер от 4~200 nm, а разделителната способност може да бъде 50 пъти по-висока от тази на обикновените микроскопи.
принцип
Микроскопът с тъмно поле е модифициран въз основа на структурата на обикновения оптичен микроскоп чрез използване на принципа на оптичния ефект на Тиндал. Кондензаторите на тъмното поле позволяват централния лъч на светлинния източник да бъде блокиран. Не е възможно да влезете в лещата на обектива през образеца отдолу нагоре. В резултат на това светлината променя пътя си и се излъчва под наклон върху наблюдавания образец. Образецът се отразява или разсейва при среща със светлината. Разсеяната светлина се хвърля в лещата на обектива, така че цялото зрително поле е тъмно.
Основният принцип на микроскопията в тъмното поле е ефектът на Тиндал. Когато светлинен лъч преминава през тъмна стая, във въздуха може да се наблюдава ярка прахова "пътека" от посоката, перпендикулярна на падащата светлина. Това явление е ефектът на Тиндал. След като микроскоп с тъмно поле се замени с кондензатор с тъмно поле на обикновен оптичен микроскоп, поради запушването на вътрешната параболична структура на кондензатора, светлината, излъчваща върху повърхността на обекта, който ще се инспектира, не може директно да влезе в обектива обектив и окуляр и само разсеяна светлина може да премине през него, като по този начин се намалява зрителното поле. е тъмно. Тъй като микроскопът с тъмно поле не излъчва прозрачна светлина в системата за директно наблюдение, когато няма обект, зрителното поле е тъмно и е невъзможно да се наблюдава какъвто и да е обект; когато има обект, светлината, пречупена обратно от обекта, и разсеяната светлина се виждат ярко на тъмния фон. . При наблюдение на обект в тъмно поле по-голямата част от осветената светлина се пречупва. Поради местоположението, структурата и дебелината на обекта (пробата), разсейването и пречупването на светлината варират значително.
Структура и модификация
Основната структура на микроскоп с тъмно поле е обикновен оптичен комплект на микроскоп плюс светлинна бариера. Един обикновен микроскоп може да се преобразува в микроскоп с тъмно поле, стига кондензаторът да може да се сваля и диаметърът на скобата е подходящ за инсталиране на кондензатор с тъмно поле. Когато няма кондензатор за тъмно поле, можете да използвате плътна черна хартия, за да направите централен светлинен щит и да го поставите върху рамката на филтъра под кондензатора на обикновен микроскоп, за да получите ефекта на тъмното поле. Светлинният щит се използва за блокиране на светлината в средата на светлинния източник, така че светлината да може да навлезе в образеца само от околната среда. Размерът е приблизително същият като размера на блендата. Различните увеличения използват различни отвори, така че трябва да се направят различни светлинни блокове.
Практическо приложение
Микроскопията с тъмно поле често се използва за наблюдение на неоцветени прозрачни проби. Тъй като тези проби имат индекс на пречупване, подобен на този на заобикалящата среда, те са трудни за ясно виждане при обикновени условия на ярко поле. Следователно условията на тъмно поле се използват за подобряване на контраста между самата проба и фона. Този вид микроскоп може да види частици с размер от 4~200 nm. Той може да види само съществуването, движението и повърхностните характеристики на обекта, но не може да различи фината структура на обекта. Клинично микроскопията в тъмно поле обикновено се използва за изследване на бледи спирохети. Това е патогенен тест, който е от голямо значение за диагностиката на ранен сифилис.
