Какви са разликите между флуоресцентната микроскопия и инвертната микроскопия
Микроскопът е важен инструмент в клетъчната култура и свързаните с нея производни експерименти. В момента на пазара има различни видове микроскопи и изборът на микроскоп, който отговаря на нуждите и е подходящ, е предизвикателство. По-долу ще представим принципите на инвертираните микроскопи и флуоресцентните микроскопи, от които всеки може да избира.
Обърнатият микроскоп, подобно на обикновения микроскоп, се състои главно от три части: механична част, осветителна част и оптична част.
Съставът на обърнат микроскоп е същият като този на обикновен изправен микроскоп, с изключение на това, че лещата на обектива и осветителната система са обърнати, като първата е под предметната площадка, а втората е над предметната площадка.
Тази структура значително разширява ефективното разстояние между осветителната прожекторна система и сцената, което улеснява поставянето на по-дебели инструменти за наблюдение, като чинии за култура и бутилки за клетъчни култури (разбира се, могат да се използват и стъклени предметни стъкла), докато работното разстояние между обектив и не е необходимо материалът да е много голям.
Инвертираният микроскоп се използва от медицински и здравни институции, университети и изследователски институти за наблюдение на микроорганизми, клетки, бактерии, тъканни култури, суспензии, утайки и др. Той може непрекъснато да наблюдава процеса на клетъчна и бактериална пролиферация и делене в хранителна среда и може да улови всяка форма на този процес.
Широко използван в области като цитология, паразитология, онкология, имунология, генно инженерство, индустриална микробиология и ботаника.
Флуоресцентната микроскопия се използва за изследване на абсорбцията, транспортирането, разпределението и локализирането на вещества в клетките.
За тествания обект има два начина за генериране на флуоресценция: спонтанна флуоресценция, която се излъчва директно от ултравиолетово облъчване; Вторичната флуоресценция възниква, когато наблюдаваният обект се третира с флуоресцентни багрила и се изложи на ултравиолетова светлина, преди да излъчи флуоресценция.
Някои вещества в клетките, като хлорофила, произвеждат спонтанна флуоресценция след излагане на ултравиолетова радиация; Някои вещества сами по себе си може да не излъчват флуоресценция, но ако бъдат оцветени с флуоресцентни багрила или флуоресцентни антитела, те също могат да излъчват вторична флуоресценция при ултравиолетово лъчение.
Флуоресцентният микроскоп използва точков светлинен източник с висока светлинна ефективност, за да излъчва светлина с определена дължина на вълната (UV 365 nm или UV синьо 420 nm) чрез система за цветно филтриране като възбуждаща светлина, която възбужда флуоресцентните вещества в пробата да излъчват различни цветове флуоресценция. След това се наблюдава чрез увеличение на обектива и окуляра.
По този начин, дори при слаба флуоресценция, той е лесно разпознаваем и силно чувствителен при силен контрастен фон. Използва се главно за изследване на клетъчната структура, функция и химичен състав.
