Три вида микроскопско наблюдение
I. Светло поле BF (Светло поле BF)
BF със светло поле е познат начин за микроскопия, който се използва широко в патологията и тестването за наблюдение на оцветени срезове и всички микроскопи могат да изпълняват тази функция.
Светло поле
II. Тъмно поле DF (Тъмно поле DF)
Тъмно поле DF всъщност е осветяване на тъмно поле. Различава се от светлото поле по това, че не наблюдава директно осветената светлина, а светлината, отразена или дифрактирана от обекта, който се изследва. В резултат на това зрителното поле става тъмен фон, докато изследваният обект изглежда като светло изображение.
Принципът на тъмното зрително поле се основава на феномена на Тиндал в оптиката, прах в случай на силна светлина чрез директна светлина, човешкото око не може да бъде наблюдавано, това се дължи на силната светлина около причината. Ако светлината е насочена косо към нея, частиците изглежда увеличават размера си поради отразяването на светлината и стават видими за човешкото око.
Специален аксесоар, необходим за наблюдение в тъмно поле, е зрителна тръба в тъмно поле. Характеризира се с това, че не позволява на светлинния лъч да преминава през изследвания обект отдолу нагоре, а променя пътя на светлината, така че да е насочен косо към изследвания обект, така че осветяващата светлина да не влиза директно в обективна леща, а яркото изображение се формира чрез използване на отразената или дифрактирана светлина от повърхността на изследвания обект. Разделителната способност при наблюдение в тъмно поле е много по-висока от наблюдението в светло поле, * до 0.02-0.004
Тъмно поле
III. Фазов контраст PH
В развитието на оптичната микроскопия успешното изобретяване на фазов контраст PH е важно постижение в съвременната микроскопска технология. Както знаем, човешкото око може да различи само дължината на вълната (цвят) и амплитудата (яркостта) на светлинните вълни, за безцветни и ярки биологични проби, когато светлината преминава през тях, дължината на вълната и амплитудата не се променят много и е трудно за наблюдение на образеца в светло поле.
Микроскопът с фазов контраст използва разликата в светлинния обхват на изследвания обект за микроскопско изследване, тоест той ефективно използва феномена на интерференция на светлината, за да промени неразличимата фазова разлика на човешкото око в различимата амплитудна разлика и дори безцветна и прозрачна веществата могат да станат ясно видими. Това значително улеснява наблюдението на живите клетки, така че фазово контрастната микроскопия се използва широко в инвертирани микроскопи.
Основният принцип на фазово-контрастната микроскопия е, че разликата в оптичния обхват на видимата светлина, предавана през образеца, се превръща в разлика в амплитудата, като по този начин увеличава контраста между различните структури и ги прави видими. Светлината се пречупва през образеца и се отклонява от първоначалния светлинен път, като същевременно се забавя с 1/4λ (дължина на вълната). Ако 1/4λ се увеличи или намали отново, разликата в оптичния обхват става 1/2λ и интерференцията между двата лъча на фотосинтезата се засилва след намесата на осите на двата лъча и амплитудата се увеличава или намалява, като по този начин подобряване на контраста. В структурата фазовият контрастен микроскоп има две специални характеристики, които са различни от обикновения оптичен микроскоп:
1. пръстеновидна диафрагма (annulardiaphragm) се намира между източника на светлина и кондензатора, ролята е да накара светлината през кондензатора да образува кух конус от светлина, фокусиращ се върху образеца.
2. фазова плоча (пръстенофазова плоча) в лещата на обектива, покрита с фазова плоча от магнезиев флуорид, директната или дифрактирана светлина може да бъде забавена фаза 1/4λ. Има два вида:
1.A фазова плоча: директната светлина със забавено 1/4 λ, две групи светлинни вълни коаксиално добавяне на светлинни вълни, увеличение на амплитудата, структурата на образеца от околната среда е по-ярка, образуването на ярък контраст (или отрицателен контраст) .
2.B фазова плоча: дифрактираната светлина се забавя с 1/4 λ, двете групи светлинни вълни след сливането на оста на светлинната вълна намаляват, амплитудата става по-малка, образуването на тъмен контраст (или положителен контраст ), структурата е по-тъмна от околната среда.
