Методът за приготвяне на микроскопски предметни стъкла
1. Метод на намазка
Методът на намазване е метод за подготовка на предметни стъкла чрез равномерно нанасяне на материали върху тях.
Материалите за цитонамазка включват едноклетъчни организми, малки водорасли, кръв, бактериална културална среда, свободни тъкани от животни и растения, тестиси, прашници и др.
При намазване трябва да се обърне внимание на:
(1) Предметното стъкло трябва да се почисти.
(2) Предметното стъкло трябва да е плоско.
(3) Покритието трябва да е равномерно. Поставете капката в средата вдясно на предметното стъкло и я разнесете равномерно с дисекционно острие или клечка за зъби.
(4) Покритието трябва да е тънко. Като използвате друго предметно стъкло като предметно стъкло, леко натиснете отдясно наляво по повърхността на предметното стъкло с нанесената течност (ъгълът между двете предметни стъкла трябва да бъде 30 градуса до 45 градуса) и нанесете равномерен тънък слой.
(5) Фиксиран. Ако е необходима фиксация, за фиксация могат да се използват химически фиксатори или методи за сушене (бактерии).
(6) Оцветяване. Бактериите използват метиленово синьо, а кръвта използва разтвор за оцветяване по Райт. Разтворът за оцветяване трябва да покрива цялата повърхност на покритието.
(7) Изплакнете. Използвайте абсорбираща хартия за абсорбиране или изсушаване.
(8) Запечатайте филма. Дългосрочно съхранение с помощта на канадско фолио за дървета.
2. Метод на пресоване на таблетки
Методът на компресия е метод за нарязване на биологични материали чрез поставянето им между предметно стъкло и капак, като се прилага определено налягане за разпръскване на тъканните клетки.
Общият процес на метода за пресоване на таблетки:
(1) Избор на материал. За да се наблюдава клетъчното делене, свежи тъканни клетки с енергично клетъчно делене трябва да бъдат избрани като материали. Като връх на корен, меристема на върха на стъблото, клетки от костен мозък, прашници (майчини клетки на прашец). Сперматозоиди (сперматоцити) и др.
(2) Фиксиран. Фиксирането на материала може да се определи според нуждите и пробата трябва незабавно да се компресира и наблюдава. Не е необходимо да се извършва отделно фиксиращо лечение (в синхрон с оцветяването); Ако материалът не се провери веднага след вземането на пробата, той може да се фиксира с фиксатор (обикновено фиксатор с оцетна киселина и алкохол). След фиксиране за 2-24 часа (в зависимост от материала), изплакнете с 95% етанол и съхранявайте в 70% етанол за по-късна употреба.
(3) Разделяне. Материалите, които не се диспергират лесно от клетките, трябва да се третират с разтвор за хидролизно разделяне (като 1N HCl или сперма на солна киселина) в продължение на 6-20 минути. След дисоциация те трябва да се изплакнат с вода преди оцветяване.
(4) Оцветяване. Има много видове багрила. Хромозомите обикновено се оцветяват с магента оцветяващ разтвор на оцетна киселина.
(5) Натиснете таблета. Поставете материала върху предметно стъкло, добавете капка вода или разтвор на багрило, покрийте предметното стъкло с капак и внимателно го натиснете с палец.
(6) Наблюдавайте. След компресия може да се наблюдава под микроскоп.
