Технически параметри и умения за използване на флуоресцентен микроскоп
Технически параметри на флуоресцентен микроскоп 1. Широкоъгълен окуляр 2. Ахроматична леща на обектив 3. Преобразувател на обектив с четири дупки 4. Устройство за падаща флуоресценция Синя (B) Зелена (G) система за възбуждане 100W живачна лампа 5. Коаксиална груба механизъм за микрофокусиране: обхват на фокусиране 15 mm Стойност на микрорешетката 0,002 mm 6. Двуслойна механична работна маса обхват на надлъжно движение: 70 mm обхват на странично движение: 50 mm
Технически параметри на флуоресцентен микроскоп
1. Широкоъгълен окуляр
2. Ахроматична леща на обектив
3. Преобразувател на обектива с четири дупки
4. Устройство за падаща флуоресценция Синьо (B) Зелено (G) Система за възбуждане 100W живачна лампа
Коаксиален механизъм за грубо микро фокусиране: обхват на фокусиране: 15 мм, стойност на микрорешетката: 0.002 мм
6. Двуслойна механична работна маса
Диапазон на надлъжно движение: 70 mm Диапазон на странично движение: 50 mm
Съвети и методи за използване на флуоресцентна микроскопия
（1） Слайд
Дебелината на слайда трябва да бъде между 0,8 и 1,2 мм. Ако предметното стъкло е твърде дебело, от една страна, то абсорбира твърде много светлина, а от друга страна, не може да доведе до събиране на възбуждаща светлина върху образеца. Стъклото трябва да е гладко и чисто, с еднаква дебелина и без значителна спонтанна флуоресценция. Понякога са необходими предметни стъкла от кварцово стъкло.
（2） Покривно стъкло
Дебелината на покривното стъкло е около 0,17 mm и то е гладко и чисто. За да се подобри възбуждането, може да се използва и интерференционно покривно стъкло. Това е специално покривно стъкло, покрито с няколко слоя вещества (като магнезиев флуорид), които имат различни интерферентни ефекти върху различните дължини на вълната на светлината. Той може да позволи на флуоресценцията да премине гладко, като същевременно отразява възбуждането, което може да възбуди пробата.
（3） Образец
Тъканните срезове или други проби не трябва да са твърде дебели. Например, ако те са твърде дебели, по-голямата част от възбуждащата светлина се консумира в долната част на образеца, докато горната част, директно наблюдавана от лещата на обектива, не е достатъчно възбудена. В допълнение, припокриването на клетките или маскирането на примеси може да повлияе на преценката.
（4） Монтажно средство
Глицеринът обикновено се използва като монтиращ агент и трябва да бъде без спонтанна флуоресценция, безцветен и прозрачен. Яркостта на флуоресценцията е по-ярка при pH 8,5 до 9,5 и не е лесно да избледнее бързо. Следователно еквивалентна смес от глицерол и 0.5 mol/l карбонатен буферен разтвор с рН от 9.0 до 9,5 обикновено се използва като монтиращ агент.
（5） Масло за огледала
Обикновено, когато използвате флуоресцентен микроскоп с тъмно поле и маслен микроскоп за наблюдение на проби, е необходимо да използвате масло за лещи. Най-добре е да използвате специално нефлуоресцентно масло за лещи, което може да бъде заменено и с гореспоменатия глицерол. Може да се използва и течен парафин, но коефициентът на пречупване е нисък, което има леко влияние върху качеството на изображението.
