Използване на стерео флуоресцентен микроскоп и предпазни мерки
Инструкции:
(1) Поставете листа с материали на сцената.
(2) Включете стабилизатора на напрежението на флуоресцентния микроскоп. След това натиснете стартовата група, за да запалите UV лампата и не я изключвайте в рамките на 15 минути и не я стартирайте отново в рамките на 3 минути след като е изключена.
(3) Завъртете филтъра за възбуждане на v, филтъра за разделяне на цветовете на v и изберете 495 или 475nm блокиращ филтър.
(4) Изберете микроскоп с флуоресцентен обектив uvFL40, uvFL100 за микроскопско изследване.
(5) Добавете нефлуоресцентно масло върху предметното стъкло, първо използвайте 40 x, а след това използвайте 100 x фокусиращ микроскоп, за да проверите. Появява се флуоресценция.
(7) Тъй като флуоресценцията на флуоресцентните вещества постепенно отслабва с времето, когато те се облъчват с ултравиолетова светлина, зрителното поле трябва да се променя често по време на микроскопско изследване.
(8) uvFL10 или uvFL20 микроскопи с ниско увеличение също могат да се използват за проверка на материали (не се добавя флуоресцентно масло, когато се използват лещи с ниска мощност).
Метод за запис на флуоресцентно изображение:
Флуоресцентното изображение, наблюдавано от флуоресцентния микроскоп, има както морфологични характеристики, така и флуоресцентен цвят и яркост. Когато се оценяват резултатите, двете трябва да се комбинират за цялостна преценка. Резултатите се записват въз основа на субективни показатели, тоест визуално наблюдение от работниците. Като цяло качествено наблюдение, основно надеждно. С развитието на технологиите и науката се използват обективни индикатори за записване на резултатите от преценката в различна степен, като клетъчни спектрофотометри, анализатори на изображения и други инструменти. Въпреки това, резултатите, записани от тези инструменти, също трябва да се комбинират със субективни преценки.
Фотографирането с флуоресцентен микроскоп е много необходимо за записване на флуоресцентни изображения. Тъй като флуоресценцията лесно избледнява и отслабва, е необходимо резултатите да се записват в реално време. Методът е по същество същият като този на обикновената микрофотография. Просто трябва да използвате високоскоростен фоточувствителен филм като ASA200 или по-висок или 24. по-висок. Тъй като ултравиолетовата светлина има силен ефект върху потушаването на флуоресценцията, като FITC маркери, яркостта на флуоресценцията ще намалее с 50 процента, когато се облъчва с ултравиолетова светлина за 30 секунди. Следователно, ако скоростта на експониране е твърде ниска, флуоресцентното изображение не може да бъде направено. Флуоресцентните микроскопи за общо изследване имат полуавтоматични или напълно автоматични фотомикрографски системни устройства.
Предпазни мерки:
(1) Работете стриктно в съответствие с изискванията на фабричните инструкции за флуоресцентен микроскоп и не променяйте програмата по желание.
(2) Проверката трябва да се извършва в тъмна стая. След като влезете в тъмната стая, свържете захранването и запалете живачната лампа със свръхвисоко налягане за 5-15 минути. След като силната светлина от източника на светлина е стабилна, очите са напълно адаптирани към тъмната стая и след това започват да наблюдават образеца.
(3) За да предотвратите увреждането на очите от ултравиолетовите лъчи, трябва да носите защитни очила, когато регулирате източника на светлина.
(4) Времето за проверка за предпочитане е 1-2 часа всеки път. Ако надхвърли 90 минути, светлинният интензитет на живачната лампа със свръхвисоко налягане постепенно ще намалее и флуоресценцията ще отслабне; след като образецът бъде облъчен с ултравиолетови лъчи за 3-5 минути, флуоресценцията също ще бъде значително отслабена; следователно не трябва да надвишава най-много 2-2 часа. 3ч.
(5) Животът на светлинния източник на флуоресцентния микроскоп е ограничен и пробите трябва да се проверяват колективно, за да се спести време и да се защити светлинният източник. Когато времето е горещо, трябва да се добавят вентилатори за разсейване на топлината, а новите крушки трябва да се записват от началото на времето им на използване. Когато искате да я използвате отново, след като лампата е изгаснала, трябва да изчакате, докато крушката се охлади достатъчно, преди да я запалите. Избягвайте да запалвате източника на светлина няколко пъти на ден.
(6) Наблюдавайте пробата веднага след оцветяването, тъй като флуоресценцията постепенно ще отслабне с времето. Ако пробата се съхранява в полиетиленов пластмасов плик при 4 градуса, времето за отслабване на флуоресценцията може да се забави и може да се предотврати изпаряването на монтиращия агент.
(7) Стандарт за преценка на яркостта на флуоресценцията: обикновено се разделя на четири нива, т.е. „едно“ – може да се види никаква или слаба флуоресценция. „плюс“—може да се види само ясно видима флуоресценция. " плюс плюс "—Видим и ярък
