Няколко въпроса при използването на фазово контрастна микроскопия:
(1) Обръщане на фазата, когато n '
(2) Ефектът на ореола и постепенното затъмняване в процеса на изобразяване при фазово-контрастна микроскопия, когато дадена структура стане по-тъмна поради забавяне на фазата, не е загуба на светлина, а резултат от преразпределение на светлината в равнината на изображението. Следователно светлината, която ясно изчезва в тъмните области, ще изглежда като ярък ореол около по-тъмните обекти. Това е недостатък на фазово-контрастната микроскопия, който затруднява наблюдението на фини структури. Когато пръстеновидният отвор е много тесен, феноменът на ореола е по-тежък. Друг феномен на фазово-контрастната микроскопия е ефектът на затъмняване, който се отнася до намаляване на контраста в краищата на по-голяма област със същото фазово забавяне, наблюдавано по време на наблюдението на фазовия контраст.
(3) Влияние на дебелината на пробата Когато се наблюдава разликата, дебелината на пробата трябва да бъде 5 μm или по-тънка. Когато използвате по-дебели проби, горният слой на пробата е ясен, докато по-дълбокият слой ще бъде размазан и ще предизвика смущения във фазовото изместване и смущения от разсейването на светлината.
(4) Влиянието на покривното стъкло и предметното стъкло върху пробата трябва да бъде покрито с покривно стъкло, в противен случай светлият пръстен на пръстеновидния отвор и тъмният пръстен на фазовата плоча трудно се припокриват. Диференциалното наблюдение също има високи изисквания към качеството на стъклото на предметното и покривното стъкло. Когато има драскотини, неравномерна дебелина или неравномерна неравност, това може да причини изкривяване на яркия пръстен и смущения във фазата. Освен това, ако предметното стъкло е твърде дебело или твърде тънко, това ще доведе до увеличаване или намаляване на пръстеновидния отвор.
Понастоящем оптичните микроскопи са еволюирали от традиционните биологични микроскопи до различни видове специализирани микроскопи. Според техните принципи на изобразяване те могат да бъдат разделени на:
① Геометричен оптичен микроскоп: включително биологичен микроскоп, микроскоп с падаща светлина, обърнат микроскоп, металографски микроскоп, микроскоп с тъмно поле и др.
② Физически оптичен микроскоп: включително фазово контрастен микроскоп, поляризационен микроскоп, интерферентен микроскоп, фазово контрастен поляризационен микроскоп, фазово контрастен интерферентен микроскоп, фазово контрастен флуоресцентен микроскоп и др.
③ Микроскопи за преобразуване на информация: включително флуоресцентни микроскопи, микроспектрометри, микроскопи за анализ на изображения, акустични микроскопи, фотографски микроскопи, телевизионни микроскопи и др.
Избройте няколко приложения на микроскопи: a Биологичен микроскоп: Най-общо казано, микроскопите могат да бъдат разделени на стерео микроскопи и биологични микроскопи. Поради различни цели и изисквания се появиха много клонове, но основните принципи остават същите. Поляризацията, фазовият контраст, предаването и падащата светлина все още се класифицират като биологични микроскопи. Стереоскопичният микроскоп, известен още като анатомичен микроскоп, солиден микроскоп и стереомикроскоп, е универсален микроскоп. Той е лесен за работа, има ниски изисквания към образците, има голямо работно разстояние и има силно усещане за триизмерност при наблюдение. Може да се използва за наблюдение на физически обекти или извършване на някои операции върху екземпляри по време на наблюдение. Вместо нарязване на пробата като биологичен микроскоп, нарязването изисква съответната технология и оборудване. Следователно стереомикроскопите имат широк спектър от приложения в области като микроелектроника, сглобяване и поддръжка на прецизни инструменти и микрогравиране. Широко използвани в анатомията и микрохирургията в областта на биологията и медицината (понастоящем класифицирани като хирургически микроскопи), източникът на светлина, използван в биологията и медицината, може да бъде само източник на студена светлина (фиброоптика); Използва се в промишлеността за наблюдение, сглобяване, проверка и друга работа на малки части и интегрални схеми. Металографски микроскоп: Много хора обичат да го пишат като „металографски микроскоп“. Металографският микроскоп е микроскоп, специално използван за наблюдение на металографската структура на непрозрачни обекти като метали и минерали. Тези непрозрачни обекти не могат да се наблюдават в обикновен трансмисионен микроскоп, така че основната разлика между тях и обикновения микроскоп е, че първият използва отразена светлина, докато вторият използва пропусната светлина за осветяване. В металографски микроскоп осветителният лъч се насочва от лещата на обектива към повърхността на наблюдавания обект, отразява се от повърхността и след това се връща към лещата на обектива за изобразяване. Този метод на отразяващо осветление също се използва широко при откриването на силициеви пластини с интегрални схеми.
