Методи за обработка на проби и етапи за електронна микроскопия
Преди да използвате трансмисионен електронен микроскоп за наблюдение на биологични проби, пробите трябва да бъдат предварително обработени. Учените използват различни методи за обработка, тъй като различните изследователски изисквания изискват.
Фиксиране: За да се запази образецът колкото е възможно повече, се използва глутаралдехид за втвърдяване на образеца и осминова киселина за оцветяване на мазнината.
Студено фиксиране: Пробата бързо се замразява в течен етан, така че водата да не кристализира и вместо това да образува аморфен лед. Образците, запазени по този начин, имат по-малко щети, но контрастът на изображението е много нисък.
Дехидратация: Използвайте етанол и ацетон, за да замените водата.
Подплатени: Пробата може да бъде разделена, след като бъде подплатена.
Сегментиране: Пробата се нарязва на тънки резени с помощта на диамантено острие.
Оцветяване: Тежките атоми като олово или уран разсейват електроните по-силно от по-леките атоми и следователно могат да се използват за увеличаване на контраста.
Преди да използвате трансмисионен електронен микроскоп за наблюдение на метали, пробата трябва да бъде
Вируси под електронен микроскоп
Нарязването на много тънки резени (около 0,1 mm) и след това използването на електролитно полиране за продължаване на изтъняването на метала често завършва с образуването на дупка в центъра на пробата, където електроните могат да преминават през много тънкия метал там. Метали, които не могат да бъдат електролитно полирани, или материали, които са непроводими или имат лоша проводимост, като силиций, обикновено се изтъняват механично и след това се обработват чрез йонен удар. За да се предотврати натрупването на статично електричество в непроводими проби в сканиращ електронен микроскоп, техните повърхности трябва да бъдат покрити с проводим слой.
Защо електронните микроскопи имат по-висока разделителна способност?
Както подсказва името, така нареченият електронен микроскоп е микроскоп, който използва електронни лъчи като източник на светлина. Тъй като електронният лъч може да се огъне под действието на външно магнитно поле или електрическо поле, образувайки феномен на пречупване, подобен на този на видимата светлина, преминаваща през стъкло, можем да използваме този физически ефект, за да създадем „леща“ за електронния лъч, като по този начин разработване на електронен микроскоп. Характеристиката на трансмисионния електронен микроскоп (TEM) е, че използваме електронни лъчи, които преминават през пробата до изображение, което е различно от сканиращия електронен микроскоп (Scanning Electron Microscope, SEM). Тъй като дължината на вълната на електронните вълни е много по-малка от дължината на вълната на видимата светлина (дължината на вълната на 100kV електронни вълни е 0,0037nm, докато дължината на вълната на виолетовата светлина е 400nm), според оптичните теория, можем да очакваме, че разделителната способност на електронните микроскопи трябва да бъде много по-добра от тази на оптичните микроскопи. Всъщност разделителната способност на съвременните електронни микроскопи е достигнала 0,1 nm. В избираемия учебник по физика за гимназисти е обяснено по-подробно (малка информация зад фотоелектричния ефект)
