Бележки и съвети за използване на няколко фазово контрастни микроскопа
1) Инсталирайте устройството за фазов контраст: отстранете кондензаторната леща на обикновения микроскоп и инсталирайте кондензаторната леща с пръстеновидна диафрагма на съответстващ микроскоп; премахнете обикновения обектив на микроскопа и го заменете с обектив с фазова плоча; заменете окуляра с фокусиращи окуляри за фазово-контрастни микроскопи; специални зелени филтри (понякога не са необходими) се поставят на светлинния вход на светлинния източник.
2) Подравняване на светлината и фокус: Регулирайте фокусиращия окуляр и винта за настройка на дебелината, докато бял кръг и черен кръг могат да се видят ясно в зрителното поле. Черният кръг е фиксиран, а белият кръг може да се премести чрез регулиране на винта на кондензаторното устройство, така че черният кръг и белият кръг напълно да съвпадат. Свалете фокусиращия окуляр и го сменете с оригиналния окуляр на микроскопа, за да проверите.
Анализ на проблемите при използване на фазово-контрастен микроскоп
1. Влиянието на дебелината на пробата Когато се извършва фазово контрастно наблюдение, дебелината на пробата трябва да бъде 5 μm или по-тънка. Когато използвате по-дебела проба, горният слой на пробата е много ясен, но дълбокият слой ще бъде замъглен и ще причини смущения във фазовото изместване. и разсейване на светлината.
2. Влиянието на покривното стъкло и предметното стъкло Пробата трябва да бъде покрита с покривно стъкло, в противен случай светлият пръстен на пръстеновидната диафрагма и тъмният пръстен на фазовата плоча трудно се припокриват. Наблюдението на фазовия контраст също има високи изисквания към качеството на стъклото на диапозитивното и покривното стъкло. Когато има драскотини, неравномерна дебелина или неравности, ще се появи ярко изкривяване на пръстена и фазова интерференция. Освен това, когато слайдът е твърде дебел или твърде тънък, яркият пръстен на пръстеновидната диафрагма ще стане по-голям или по-малък.
3. Ефект на ореол и избледняване В процеса на изобразяване на фазов контрастен микроскоп, когато дадена структура стане тъмна поради забавяне на фазата, това не е загуба на светлина, а резултат от преразпределение на светлината в равнината на изображението. Така че светлината, която очевидно се губи в тъмните области, ще изглежда като ярък ореол около по-тъмните обекти. Това е недостатък на фазово-контрастната микроскопия, който затруднява наблюдението на фини структури, а феноменът на ореола е по-сериозен, когато пръстеновидната диафрагма е много тясна. Друго явление във фазово-контрастната микроскопия е ефектът на засенчване, който се отнася до загубата на контраст в краищата на по-голяма област със същото фазово забавяне, когато се наблюдава чрез фазов контраст.
4. Фазова инверсия Когато n'n, светлият и тъмният контраст на изображението са точно противоположни, което се нарича фазова инверсия. Неразпознаваем е, когато фазовата разлика δ=0 и контрастът стават по-големи с увеличаването на δ, а фазовата инверсия ще се появи, когато δ продължи да се увеличава до определена стойност. Когато се използва обектив с 90 процента висока стойност на абсорбция (висок контраст), тази стойност на трансформация е около 0.55λ, а когато се използва обектив със 70 процента стандартна стойност на абсорбция, тя е около 0,33λ . Обективи с по-високи стойности на абсорбция трябва да се използват за разрешаване на по-малки разлики в оптичния път.
