Въведение в основните принципи на фазово-контрастната микроскопия
Фазово-контрастната микроскопия е специален микроскоп, който преобразува оптичната разлика в пътя (т.е. фазовата разлика), генерирана, когато светлината преминава през детайли на прозрачен образец, в разлика в интензитета на светлината.
Когато светлината преминава през относително прозрачен образец, няма очевидна промяна в дължината на вълната (цвят) и амплитудата (яркостта) на светлината. Следователно, когато се наблюдават неоцветени образци (като живи клетки) с обикновен оптичен микроскоп, неговата морфология и вътрешна структура често са трудни за разграничаване. Въпреки това, поради разликите в коефициента на пречупване и дебелината на различните части на клетката, когато светлината преминава през този образец, дължините на оптичния път на директната и дифрактирана светлина ще бъдат различни. Тъй като дължината на оптичния път се увеличава или намалява, фазата на светлинните вълни, които се ускоряват или изостават, се променя (създава фазова разлика). Фазовата разлика на светлината не може да се усети с невъоръжено око, но фазово-контрастният микроскоп може да използва специалното си устройство - пръстеновидна диафрагма и фазова пластина, за да използва явлението интерференция на светлината, за да преобразува фазовата разлика на светлината в амплитудна разлика (светлина и тъмно), които могат да бъдат открити от човешкото око. разлика), така че оригиналният прозрачен обект показва очевидни разлики в светлината и тъмнината и контрастът е подобрен, което ни позволява по-ясно да наблюдаваме живи клетки и вътреклетъчни компоненти, които не могат да се видят или не могат да се видят ясно под обикновени оптични микроскопи и тъмно поле микроскопи. определени микроструктури.
Принципът на изобразяване на фазов контрастен микроскоп: Източникът на светлина за микроскопско изследване може да премине само през прозрачния пръстен на пръстеновидната диафрагма и след това да бъде кондензиран в светлинен лъч от кондензатора. Когато този светлинен лъч преминава през обекта, който ще бъде инспектиран, светлината ще бъде различна поради различните дължини на оптичния път на всяка част. степен на отклонение (дифракция). Тъй като изображението, образувано от прозрачния пръстен, случайно съвпада със задната фокална равнина на лещата на обектива и спрегнатата равнина на фазовата плоча. Следователно неотразената директна светлина преминава през конюгираната повърхност, докато отклонената дифрактирана светлина преминава през компенсационната повърхност. Поради различните свойства на конюгираната повърхност и компенсационната повърхност на фазовата плоча, те ще произведат определена фазова разлика и отслабване на интензитета на светлината, преминаваща съответно през тези две части. След това двата комплекта светлина се събират от задната леща и се връщат към същия оптичен път. Пътувайки, директната светлина и дифрактираната светлина ще се намесват една в друга, променяйки фазовата разлика в амплитудна разлика. По този начин, по време на фазово контрастна микроскопия, светлината, преминаваща през безцветното прозрачно тяло, превръща фазовата разлика, която е неразличима за човешкото око, в амплитудна разлика (разлика между светлина и тъмнина), която човешкото око може да различи.
