Методи и предпазни мерки при използване на флуоресцентен микроскоп
Начин на употреба:
(1) Поставете листа с материала върху носещата платформа.
(2) Включете регулатора на напрежението на флуоресцентния микроскоп. След това натиснете стартовата група, за да запалите UV лампата не трябва да се изключва за 15 минути и не трябва да се рестартира 3 минути след като е изключена.
(3) Завъртете филтъра за възбуждане на v, дихроичния филм на v, изберете 495 или 475 nm блокиращ филтър.
(4) Изберете uvFL40, uvFL100 флуоресцентна микроскопия с обективна леща.
(5) Добавете нефлуоресцентно масло върху предметното стъкло, първо 40 x, а след това 100 x фокусираща микроскопия. Показване на флуоресценция.
(7) Тъй като флуоресцентният материал чрез ултравиолетово облъчване с нарастването на флуоресценцията постепенно отслабва с течение на времето, така че микроскопското изследване трябва често да променя зрителното поле.
(8) може също да използва uvFL10 или uvFL20 материал за микроскопия с ниско увеличение (с ниско увеличение без добавяне на нефлуоресцентно масло).
Метод за запис на флуоресцентно изображение:
Флуоресцентно изображение, наблюдавано от флуоресцентен микроскоп, едното е с морфологични характеристики, второто е с цвета и яркостта на флуоресценцията, при преценката на резултатите двете трябва да бъдат комбинирани с цялостна преценка. Резултатите се записват по субективни показатели, т.е. чрез визуално наблюдение от работника. Като цяло качествено наблюдение, основно надеждно. С развитието на технологиите и науката, в различна степен, използването на обективни индикатори за записване на резултатите от преценката, като използването на клетъчен спектрофотометър, анализатор на изображения и други инструменти. Въпреки това, резултатите, записани от тези инструменти, също трябва да бъдат комбинирани със субективна преценка.
Технологията за фотографиране с флуоресцентен микроскоп е много необходима за записване на флуоресцентни изображения, тъй като флуоресценцията лесно избледнява и отслабва, за незабавно записване на резултатите от фотографията. По същество методът е същият като обикновената микрография. Просто трябва да използвате високоскоростен фотографски филм като ASA200 по-горе или 24. по-горе. Тъй като ултравиолетовата светлина върху ефекта на флуоресцентен взрив, като FITC маркери, при облъчване с ултравиолетова светлина 30-те години, яркостта на флуоресценцията намалява с 50%. Следователно скоростта на експониране е твърде ниска, за да улови флуоресцентното изображение. Флуоресцентните микроскопи за общи изследвания имат полуавтоматични или напълно автоматични устройства за микрофотография.
Предпазни мерки:
(1) Работете в строго съответствие с изискванията на фабричното ръководство за флуоресцентен микроскоп, не променяйте процедурата произволно.
(2) Проверката се извършва в тъмна стая. След като влезете в тъмната стая, свържете захранването, запалете живачната лампа с ултрависоко налягане за 5-15 минути, изчакайте, докато източникът на светлина излъчи силна светлина, за да се стабилизира и очите са напълно адаптирани към тъмната стая, и след това започнете да наблюдавате екземпляра.
(3) За да предотвратите увреждане на очите от ултравиолетовата светлина, трябва да носите защитни очила, когато регулирате източника на светлина.
(4) проверявайте времето всеки път, когато е подходящо 1 ~ 2 часа, повече от 90 минути, интензитетът на светлината на живачната лампа с ултрависоко налягане постепенно намалява, флуоресценцията отслабва; проби, облъчени с ултравиолетова светлина 3 ~ 5 минути, флуоресценцията също е значително отслабена; следователно, * не трябва да бъде повече от 2 ~ 3 часа.
(5) Животът на светлинния източник на флуоресцентния микроскоп е ограничен, образецът трябва да бъде централизиран преглед, за да се спести време и да се защити светлинният източник. Когато е горещо, трябва да се добави вентилатор за охлаждане, новата крушка трябва да се запише от началото на използването на времето. Когато лампата е изгаснала и искате да я използвате отново, крушката трябва да бъде достатъчно охладена преди запалване. Източникът на светлина трябва да се избягва няколко пъти.
(6) Наблюдавайте пробата веднага след оцветяването, тъй като флуоресценцията постепенно ще намалее с времето. Ако образецът се постави в полиетиленов пластмасов плик, съхраняван при 4 градуса, това може да забави времето на отслабване на флуоресценцията и да предотврати изпаряването на запечатващия агент.
(7) Критерии за преценка за яркостта на флуоресценцията: обикновено разделени на четири нива, т.е. „едно“ – липса или видима слаба флуоресценция. '+' - само ясно видима флуоресценция. '+ +' - видимо с ярко
