Разлика между флуоресцентен микроскоп и лазерен конфокален микроскоп
флуоресцентен микроскоп
1. Флуоресцентният микроскоп използва ултравиолетова светлина като източник на светлина, който се използва за облъчване на открития обект, за да го накара да излъчва флуоресценция, и след това да наблюдава формата и позицията на обекта под микроскопа. Флуоресцентният микроскоп се използва за изследване на абсорбцията, транспортирането, разпределението и местоположението на химични вещества в клетките. Някои вещества в клетките, като хлорофила, могат да флуоресцират след облъчване с ултравиолетови лъчи; Други вещества не могат да флуоресцират сами по себе си, но могат да флуоресцират след боядисване с флуоресцентни багрила или флуоресцентни антитела и облъчване с ултравиолетови лъчи. Флуоресцентният микроскоп е един от инструментите за качествено и количествено изследване на тези вещества.
2, принцип на флуоресцентен микроскоп:
(a) Източник на светлина: Източникът на светлина излъчва светлина с различни дължини на вълната (от ултравиолетова до инфрачервена).
(b) Възбуждащ филтърен източник на светлина: предаване на светлина със специфична дължина на вълната, която може да накара пробата да флуоресцира, като същевременно блокира светлина, която е безполезна за възбуждаща флуоресценция.
(c) Флуоресцентни проби: обикновено се оцветяват с флуоресцентни пигменти.
(d) Блокиращ филтър: блокира възбуждащата светлина, която не се абсорбира от образеца, за селективно предаване на флуоресценция, като някои дължини на вълните във флуоресценцията също се предават селективно. Микроскоп, който използва ултравиолетова светлина като източник на светлина, за да накара облъчения обект да излъчва флуоресценция. Електронният микроскоп е сглобен за първи път от Knohl и Ha Roska в Берлин през 1931 г. Този микроскоп използва високоскоростен електронен лъч вместо светлинен лъч. Тъй като дължината на вълната на електронния поток е много по-къса от тази на светлинната вълна, увеличението на електронния микроскоп може да достигне 800 хиляди пъти, а минималната граница на разделителна способност е 0,2 нанометъра. Сканиращият електронен микроскоп, който започва да се използва през 1963 г., може да накара хората да видят малките структури на повърхността на предметите.
3. Обхват на приложение: използва се за уголемяване на изображението на малки предмети. Обикновено се прилага за наблюдение на биология, медицина и микроскопични частици.
Конфокален микроскоп
1. Конфокалният микроскоп добавя полурефлективна полулеща върху оптичния път на отразената светлина, която пречупва отразената светлина, преминала през лещата в други посоки. Във фокуса му има преграда с отвор, а отворът се намира във фокуса. Зад преградата има фотоумножителна тръба. Може да си представим, че отразената светлина преди и след фокуса на светлината за откриване преминава през тази конфокална система и няма да бъде фокусирана върху малката дупка, а ще бъде блокирана от преградата. Така че фотометърът измерва интензитета на отразената светлина във фокуса.
2. Принцип: Традиционният оптичен микроскоп използва полевия източник на светлина и изображението на всяка точка върху образеца ще бъде повлияно от дифракцията или разсеяната светлина на съседните точки; Лазерно сканиращият конфокален микроскоп сканира всяка точка от фокалната равнина в образеца, като използва точковия светлинен източник, образуван от лазерния лъч, преминаващ през отвора за осветяване. Облъчената точка върху образеца се изобразява в отвора за откриване, който се получава точка по точка или линия по точка от фотоумножителна тръба (PMT) или студено свързано устройство (cCCD) след откриване на отвора и бързо се формира флуоресцентно изображение върху екрана на компютърния монитор. Точковият отвор за осветяване и отворът за откриване са спрегнати по отношение на фокалната равнина на лещата на обектива и точките във фокалната равнина се фокусират върху отвора за осветяване и отвора за излъчване едновременно, а точките извън фокалната равнина няма да бъдат изобразени в дупката за откриване, така че полученото конфокално изображение да е оптичното напречно сечение на образеца, което преодолява дефекта на замъгленото изображение на обикновения микроскоп.
3. Области на приложение: включващи медицина, изследване на животни и растения, биохимия, бактериология, клетъчна биология, тъкани и ембриони, наука за храните, генетика, фармакология, физиология, оптика, патология, ботаника, неврология, морска биология, материалознание, електронна наука, механика, петролна геология и минералогия.
