Какви спецификации на пробите са необходими за светлинна микроскопия?
В процеса на подготовка на пробата на оптичния микроскоп дебелината на среза на пробата е между 2-25um; дебелината на среза на електронния микроскоп е в рамките на 50-100nm (с изключение на електронния микроскоп с високо напрежение, чиято дебелина на пробата може да достигне 1 um), така че използваният метод на среза не е един и същ.
По отношение на носителя, носителят на секцията на оптичния микроскоп е предметно стъкло, докато носителят на секцията на електронния микроскоп е решетка.
По отношение на фиксацията, срезовете на оптичния микроскоп се фиксират с комбиниран фиксатор, докато срезовете на електронния микроскоп се фиксират многократно с един фиксатор.
По отношение на оцветяването, оцветяването на оптични проби е относително просто. Според различни проби за наблюдение и видове оптични микроскопи обикновено е достатъчно да се оцвети с някои фиксирани оцветяващи агенти. Има много и сложни методи за повторно оцветяване на проби от електронен микроскоп, като отрицателно оцветяване, оцветяване със сребро и т.н.
По отношение на вграждането, парафин, колодий, желатин и др. се използват като вграждащи агенти за оптични микроскопски секции; епоксидна смола, полистиролова смола, изобутиленова смола и водоразтворима смола се използват като вграждащи агенти за секции на електронен микроскоп.
За да се гарантира, че зрителното поле на микроскопа може да бъде равномерно и напълно осветено, оптичната система за осветяване трябва да се регулира, когато микроскопът се инсталира за първи път и се отстраняват грешки. Това е важно средство и най-основният начин за правилно използване на микроскопа и получаване на правилни и надеждни резултати. изисквания. В допълнение, правилното овладяване на настройката на системата за оптичен път на осветяване е необходима стъпка след смяна на крушката на източника на светлина по време на използване на микроскопа, а също така е необходимо средство за проверка на работата на микроскопа от време на време през ежедневието използване. Настройката на системата за оптичен път на осветяване на микроскопа включва главно следните четири елемента: 1. Предварителна настройка на камерата на лампата на светлинния източник извън микроскопа ① Първо отворете корпуса на камерата на лампата, натиснете пружинния скоб, за да поставите халогенната крушка в гнездо и избягвайте директен контакт с крушката с пръсти по време на монтажа (може да се отдели с мека кърпа или хартия), за да се избегне Има отпечатъци от пръсти и други замърсявания по крушката, което ще повлияе на експлоатационния живот на крушката. ②Поставете корпуса на лампата на масата, след като включите захранването, използвайте специална отвертка, за да регулирате отвора на копчето за фокусиране на лампата (отбелязан с „←→“), така че нишката да се проектира върху стената 1-2 m и изображението на нишката се коригира. След това регулирайте височината на лампата и регулирайте отвора за резба (маркиран с "──"), за да направите позицията на нажежаемата жичка подходяща; след това регулирайте лявата и дясната позиция на лампата, за да регулирате отвора за винт (маркиран с "──"), за да направите лявата и дясната позиция на нажежаемата жичка подходяща.
2. Целта на проверката и коригирането на позицията на осветителното тяло (нажежаемата жичка) на източника на светлина в микроскопа е да се настрои края на изображението на осветителното тяло право в зрителното поле на лещата на обектива и да се гарантира, че зрителното поле на микроскопът е напълно и равномерно осветен от гледна точка на светлинния източник. Осветление, което е предпоставка за настройка на осветителната система Kuhler. Необходими основни инструменти: Центриращият телескоп е оборудван при закупуването на микроскопа. ① Изключете матовия стъклен капак в корпуса на лампата и поставете корпуса на лампата обратно на микроскопа. ② Изберете обектив 10×, включете програмата за източник на светлина, за да намерите пробата и да я фокусирате ясно, след което използвайте обектив 40×, за да фокусирате ясно пробата (40× обектив Можете да видите цялата картина на нажежаемата жичка ); ③ Отворете диафрагмата на апертурата и полевата диафрагма на кондензатора до максимум; ④ Изключете един от окулярите, сменете го с центриращ телескоп, хванете бялата част, опънете черния окуляр с другата ръка. Можете да видите изображението на нишката в зрителното поле; ⑤ Ако позицията на нишката не е подходяща, регулирайте отвора „──“, за да регулирате изображението на нишката в хоризонтална посока, и регулирайте отвора „──“, за да регулирате изображението на нишката във вертикална посока, докато Настройте изображението на нишката към светлинния кръгъл образ, който просто запълва блендата на лещата на обектива; ⑥ След настройката поставете матираната стъклена втулка обратно в първоначалната позиция, изключете центриращия телескоп и сменете окуляра за следващата настройка. Гореспоменатото регулиране на камерата на лампата на светлинния източник извън микроскопа и проверката на позицията на светещото тяло на светлинния източник вътре в микроскопа трябва да се извърши само когато микроскопът е инсталиран за първи път и са отстранени грешки и когато крушката е сменена , а микроскопът не може да се регулира произволно при използване на микроскопа. В случай на объркване, той може да бъде коригиран обратно в първоначалното състояние според горните стъпки.
3. Правилна настройка на системата за осветяване на Kohler Една от основните задачи на правилната настройка на микроскопа е настройката на системата за оптичен път на осветяване, а ключът е настройката на системата за осветяване на Kohler. За всеки човек, който използва микроскоп, особено тези, които правят фотомикрографии, те трябва да имат известно разбиране и владеене на принципа на осветителната система Kuhler и нейните стъпки за настройка, за да се даде пълна игра на функциите на микроскопа и да се правят снимки. Снимките, които излизат, могат да бъдат по-последователни и перфектни като ефект. Принципът на осветителната система на Kohler е прост: светлината, излъчвана от която и да е точка на източника на светлина, може да освети зрителното поле на микроскопа и светлината, излъчвана от всяка точка на източника на светлина, се събира и в полето изглед на микроскопа Постига се много пълно и равномерно осветяване. Целта на регулирането на осветителната система на Kuhler е да се получи равномерно и достатъчно осветление за наблюдаваното зрително поле и да се предотврати влиянието на разсеяната светлина или смущенията в системата за изображения, така че да се избегне замъгляване на филма по време на фотографиране. Необходими компоненти за осветителна система Kohler с висока настройка: полева диафрагма, система от събирателни лещи, която може да се регулира по оста. ① Изберете 10× обектив и 10× окуляр ② Поставете предната леща на кондензатора в оптичния път, регулирайте апертурната диафрагма на умерена позиция (не твърде голяма или малка), след това повдигнете кондензатора до най-горна позиция и регулирайте въртящата се маса на кондензатора на светло поле "J" позиция ③ Регулирайте полевата диафрагма до минимум (0,1)
④ Поставете запечатаната биологична проба на сцената, включете източника на светлина и фокусирайте ясно
⑤ Ще има частично осветена област или светло петно в зрителното поле, което е замъгленото изображение на полевата диафрагма, в което детайлите на пробата могат да се видят ясно; отвън е по-тъмно зрително поле, което не е задължително да вижда ясно детайлите на пробата
⑥Регулирайте леко кондензатора надолу, така че светлото петно в зрителното поле постепенно да се свие и постепенно да се превърне в ясно многоъгълно изображение, което е ясното изображение на полевата диафрагма;
⑦По принцип многоъгълното изображение не е в центъра на зрителното поле и е необходимо да регулирате чифт центриращи винтове на кондензатора, за да регулирате многоъгълното изображение на полевата диафрагма в централната позиция;
⑧Постепенно отворете диафрагмата на зрителното поле, за да направите многоъгълното изображение вписан многоъгълник на зрителното поле и допълнително проверете състоянието на подравняване. Ако подравняването не е идеално, продължете с фината настройка на винта за подравняване;
⑨Отворете леко диафрагмата на зрителното поле, така че многоъгълното й изображение просто да изчезне на ръба на зрителното поле. До момента е завършена настройката на осветителната система Kohler. След като осветителната система Kohler е настроена, цялото зрително поле е равномерно осветено и направените микроснимки са ярки и ясни с нормален контраст.
