Какви са изискванията за пробите за светлинна микроскопия?
В процеса на подготовка на пробата на оптичния микроскоп, дебелината на среза на пробата е между 2 и 25 um; дебелината на среза на електронния микроскоп е в рамките на 50-100nm (с изключение на електронния микроскоп с високо напрежение, дебелината на пробата може да достигне 1 um), така че използваният метод на нарязване не е един и същ.
По отношение на носителя, носителят на секцията на оптичния микроскоп е предметно стъкло, а носителят на секцията на електронния микроскоп е носещата решетка.
По отношение на фиксацията, срезовете на оптичния микроскоп се фиксират със сложен фиксатор, докато срезовете на електронния микроскоп се фиксират многократно с един фиксатор
По отношение на оцветяването, оцветяването на оптични проби е относително просто. Според различните проби за наблюдение и вида на оптичния микроскоп обикновено е достатъчно да се използват някои фиксирани петна. Има много методи за повторно оцветяване на проби от електронен микроскоп и те също са много сложни, като отрицателно оцветяване, оцветяване със сребро и т.н.
По отношение на вграждането, парафин, колодий, желатин и др. се използват като вграждащи агенти за оптични микроскопски секции; епоксидна смола, полистиролова смола, изобутиленова смола и водоразтворима смола се използват като вграждащи агенти за секции на електронен микроскоп.
За да може зрителното поле на микроскопа да получи равномерно и достатъчно осветление, е необходимо да се настрои системата за оптичен път на осветяване, когато микроскопът е инсталиран за първи път и е отстранена грешката. изисквания. В допълнение, правилното разбиране на настройката на системата за оптичен път на осветяване е необходима стъпка след смяна на електрическата крушка в процеса на използване на микроскопа, а също така е необходимо средство за тестване на работата на микроскопа от време на време в процес на ежедневна употреба. Настройката на системата за оптичен път на осветяване на микроскопа включва основно следните 4 елемента: 1. Предварителна настройка на камерата на лампата на източника на светлина извън микроскопа ① Първо отворете корпуса на камерата на лампата и поставете халогенната крушка в гнездото, като натиснете пружинната скоба. Мръсотия като отпечатъци от пръсти, оставени върху крушката, ще повлияе на живота на крушката. ②Поставете помещението с лампата на масата, след като включите захранването, използвайте специална отвертка, за да регулирате отвора на копчето за фокусиране на лампата (отбелязан с „←→“), така че нишката да се проектира върху стената 1-2 m и изображението на нишката се коригира. След това регулирайте височината на лампата, за да регулирате отвора на нажежаемата жичка (маркиран с "──"), за да направите позицията на нажежаемата жичка подходяща; след това регулирайте лявата и дясната позиция на винтовите отвори на лампата (маркирани с "──"), за да направите лявата и дясната позиция на нажежаемата жичка подходяща.
2. Целта на проверката и корекцията на позицията на осветителя (нишката) на светлинния източник в микроскопа е да се настрои краят на изображението на осветителя в зрителното поле на лещата на обектива и да се гарантира, че зрителното поле на микроскопа се получава напълно и равномерно от гледна точка на светлинния източник. Осветление, което е предпоставка за настройка на осветителната система Kühler. Необходими основни инструменти: Центриращите телескопи са оборудвани с микроскоп. ① Изключете матовия стъклен капак в корпуса на лампата и поставете корпуса на лампата обратно на микроскопа ② Изберете обектив 10×, включете програмата за източник на светлина, за да намерите пробата и регулирате ясно фокуса, след което използвайте обектив 40× леща за ясно фокусиране на пробата (40× леща на обектив Цялата картина на нишката може да се види ясно); ③ Отворете диафрагмата на апертурата и полевата диафрагма на кондензатора до максимум; ④ Изключете един от окулярите, сменете го с центриращ телескоп, хванете бялата част и изпънете черния окуляр с другата ръка. Изображението на нишката може да се види в зрителното поле; ⑤Ако позицията на нишката не е подходяща, регулирайте отвора "──", регулирайте изображението на нишката в хоризонтална посока, регулирайте отвора "──" и регулирайте изображението на нишката във вертикална посока, докато Настройте изображението на нишката до кръгло изображение, което просто запълва блендата на обектива; ⑥ След настройката поставете матираната стъклена втулка обратно в първоначалната й позиция, изключете центриращия телескоп и сменете окуляра за следващата настройка. Гореспоменатото регулиране на стаята с лампата на светлинния източник извън микроскопа и калибрирането на позицията на осветителя на светлинния източник вътре в микроскопа трябва да се извърши само когато микроскопът е инсталиран и отстранен за първи път и крушката е заменени. В случай на объркване можете да го възстановите в първоначалното състояние според горните стъпки.
3. Правилна настройка на системата за осветяване на Kohler (Kohler) Правилната настройка на микроскопа, една от основните задачи е настройката на системата за осветяване на светлината, а ключът е настройката на системата за осветяване на Kohler. За всеки, който използва микроскопи, особено тези, които правят микрографии, те трябва да имат известно разбиране и владеене на принципите на системата за осветяване на Kühler и нейните стъпки за настройка, така че да могат да изпълнят пълноценно функциите на микроскопа. Получените снимки могат да бъдат по-последователни и перфектни като ефект. Принципът на осветителната система на Kühler е прост: светлината, излъчвана от всяка точка на осветителя на източника на светлина, може да осветява зрителното поле на микроскопа и светлината, излъчвана от всяка точка на осветителя на източника на светлина, се събира и е в зрителното поле на микроскопа. Постига се много достатъчно и равномерно осветяване. Целта на регулирането на системата за осветяване на Kuhler е да се получи равномерно и достатъчно осветление за наблюдаваното зрително поле и да се предотврати влиянието на разсейващата се светлина върху системата за изображения или да се намесва в нея, така че да се избегне образуването на мъгла върху негатива по време на фотографиране. Основни компоненти на осветителна система Kühler с висока настройка: полева диафрагма, кондензаторна система с регулиране по оста. ① Изберете 10× обектив и 10× окуляр ② Поставете предната леща на кондензатора в оптичния път, регулирайте апертурната диафрагма на умерена позиция (не твърде голяма или не твърде малка), след това вдигнете кондензатора в най-горна позиция и регулирайте въртящата се маса на кондензатора на светло поле "J" позиция ③ Регулирайте полевата диафрагма на минимум (0,1)
④ Поставете запечатаната биологична проба на сцената, включете източника на светлина и фокусирайте ясно
⑤ В зрителното поле ще се появи локално осветена област или светло петно, което е замъглено изображение на полевата диафрагма, в което детайлите на пробата могат да се видят ясно; Вижте ясно детайлите на пробата
⑥ Намалете леко кондензатора, така че яркото петно в зрителното поле постепенно да се стеснява и постепенно да се превърне в ясно многоъгълно изображение, което е ясното изображение на полевата диафрагма;
⑦ При нормални обстоятелства многоъгълното изображение не е в центъра на зрителното поле. Необходимо е да регулирате чифт центриращи винтове на кондензатора, за да регулирате многоъгълното изображение на зрителното поле към централната позиция;
⑧ Постепенно отворете диафрагмата на зрителното поле, за да накарате многоъгълното изображение да стане вписан многоъгълник на зрителното поле, и допълнително проверете състоянието на подравняване. Ако подравняването не е идеално, продължете да регулирате леко винта за подравняване;
⑨ Леко отворете полевата диафрагма, за да изчезне многоъгълното изображение в края на зрителното поле. На този етап настройката на осветителната система Kühler е завършена. След като системата за осветяване на Kühler беше настроена, цялото зрително поле беше осветено равномерно и микрографиите бяха ярки и ясни с нормален контраст.
