Биологичен микроскоп по отношение на обема на тъканните блокове
Биологична микроскопия Досега студената фиксация, замразените ултратънки срезове и лиофилизацията са рутинни методи за рентгенови микросрезове на тъкани и клетки. Следват подробностите за този метод:
Биологични микроскопи. За микроскопи с кондензатор, кондензаторът може да се движи нагоре и надолу, за да се постигне умерена яркост. В допълнение, апертурата на диодите с променлива светлина може да се променя, за да се постигне умерена яркост 9b. Ако светлината е ярка, кондензаторът може да се повдигне по подходящ начин и апертурата на променливата светлина може да бъде подходящо увеличена. Ако светлината е твърде силна, кондензаторът може да бъде намален по подходящ начин и апертурата на напречния светлинен лъч може да бъде съответно намалена. Ако все още се чувствате заслепени при тази ситуация, можете да изберете подходящ филтър и да го поставите на скобата под кондензатора. По този начин можете да получите яркостта, която ви удовлетворява. Разбира се, необходим е определен период от практиката, за да придобиете опит в регулирането на горната и долната позиция на кондензатора, за да постигнете променлив размер на апертурата и да изберете подходящи филтри.
Много важен въпрос в биологичната микроскопия е, че по време на процеса на събиране и разделяне на клетки, след сушене чрез замразяване и вграждане на смола (FD), след замразяване на ултратънки пелети и след сушене чрез замразяване, съдържанието на 65 елемента на всяка част трябва да се анализират много внимателно и категорично да не се повреждат клетките, които ще се анализират. Тъй като рентгеновият микрозонален анализ не само включва много стъпки, но и струва много. Ако след дълго време и множество стъпки, анализираните клетки са увредени клетки или мъртви клетки, би било жалко да се правят грешни заключения. Например кардиомиоцитите, изолирани след третиране с колагеназа, имат две форми, едната е дълга пръчковидна, а другата е кръгла. Последните са умиращи клетки, които се увреждат по време на клетъчната изолация.
Биологична микроскопия Съдържанието и разпределението на електролитите в тези два вида клетки са много различни. Na е много висок и K е много нисък в кръглите кардиомиоцити, а концентрацията на Ca в линейните клонове е много висока. След проверка с други методи за анализ беше доказано, че високият Na и ниският K в кръглите клетки и високият ca в митохондриите се дължат на увреждане на клетъчната мембрана по време на процеса на разделяне на клетките. Методът на студено фиксиране на клетки и тъкани често е първо да се охладят и фиксират и след това да се съхраняват в течен азот. Закаляването и фиксацията са много важни за ефекта на консервиране. Живите клетки или свежите тъкани са богати на вода. При охлаждане частите от клетките или тъканите, които са в пряк контакт с криогена (особено когато се охлаждат с течен азот), първо се замразяват и фиксират, като по този начин се образува „обвивка“, която пречи на централната част на клетките да бъде смачкана. и студено фиксирани. Ето защо, когато се прави анализ на микрозона с X-линия, често се открива, че има ледени кристали в центъра на по-големи клетки. За да се предотврати това, като натрошен хладилен агент се използва вещество с по-висока точка на топене от течния азот, но по-ниска сухота от -806c. Има много такива вещества, но най-лесният и най-евтиният е концентриран пропан (точка на кипене - 42.120c, точка на топене - 187.10c, молекулно тегло 44.1), а скоростта на охлаждане също е най-бърза. Но недостатъкът му е, че е запалим.
Биологичният микроскоп може да постави мускулното влакно върху специална рамка. Когато свиването на мускулните влакна достигне определена фаза и трябва да се фиксира, дюзата се стартира незабавно, за да пръска течен пропан към мускулните влакна, за да ги охлади и фиксира. След това мускулните влакна заедно с рамката бяха извадени и поставени в течен азот. Ако кръвните клетки или отделените клетки са фиксирани, първо центрофугирайте на ниска скорост, за да концентрирате клетките, прехвърлете клетките в малка сребърна епруветка с добра топлопроводимост, поставете епруветката в течен пропан и замразете, за да я фиксирате. Когато фиксирате панкреаса на плъх в лабораторията на Хол, първо охладете предварително двата стоманени блока с течен хелий (или течен азот), затегнете двата медни блока с форцепс и ги поставете преди и след панкреаса, за да охладите и фиксирате маточната жлеза . Тъканите или клетките могат да бъдат охладени и фиксирани и след това прехвърлени в течен азот за дългосрочно съхранение.
