Защо ви е необходим конфокален микроскоп?
1. След усилията и подобренията на нашите велики предшественици, оптичният микроскоп е достигнал точката на съвършенство. Всъщност обикновените микроскопи могат да ни осигурят красиви микроскопични изображения просто и бързо. Въпреки това се случи събитие, което донесе революционна иновация в този почти перфектен свят на микроскопи, което е изобретяването на "лазерно сканиращия конфокален микроскоп". Характеристиката на този нов тип микроскоп е, че той използва оптична система, която извлича информация за изображението само върху повърхността, където е концентриран фокусът, и възстановява получената информация в паметта на изображението, докато променя фокуса, така че пълната 3D информация може да бъде получено. Ярък образ на интелигентност. С този метод е възможно лесно да се получи информация за формата на повърхността, която не може да бъде потвърдена с нормален микроскоп. В допълнение, за обикновените оптични микроскопи "увеличаването на разделителната способност" и "задълбочаването на дълбочината на фокуса" са противоречиви условия, особено при големи увеличения, това противоречие е по-видно, но по отношение на конфокалните микроскопи този проблем е лесно решен.
2. Предимства на конфокалната оптична система
Конфокалната оптична система извършва точково осветяване на пробата, а отразената светлина също се приема от точковия рецептор. Когато пробата е поставена във фокусна позиция, почти цялата отразена светлина може да достигне до фоторецептора, а когато пробата е извън фокус, отразената светлина не може да достигне до фоторецептора. Това означава, че в конфокалната оптична система само изображението, което съвпада с фокусната точка, ще бъде изведено, а светлинните петна и безполезната разсеяна светлина ще бъдат екранирани.
3. Защо да използваме лазер?
В конфокалната оптична система пробата се осветява в точка и отразената светлина също се приема от точков фоторецептор. Следователно е необходим точков източник на светлина. Лазерите са много точкови източници на светлина. В повечето случаи лазерните източници на светлина се използват като източници на светлина за конфокални микроскопи. В допълнение, характеристиките на монохроматичност, насоченост и отлична форма на лазерния лъч също са важни причини за широкото му приемане.
4. Става възможно наблюдение в реално време, базирано на високоскоростно сканиране
За лазерно сканиране, хоризонталната посока приема акустичен оптичен дефлектор (AO елемент), а вертикалната посока приема серво електронно контролирано огледало за сканиране на лъч (Серво галвано-огледало). Тъй като акустично-оптичният отклоняващ модул няма механична вибрационна част, той може да извършва високоскоростно сканиране и е възможно наблюдение в реално време на екрана на монитора. Това високоскоростно изобразяване е много важен елемент, който пряко влияе върху скоростта на фокусиране и извличане на позиция.
5. Връзката между позицията на фокуса и яркостта
В конфокалната оптична система яркостта на образеца е максимална, когато образецът е правилно поставен във фокусна позиция и неговата яркост ще намалее рязко преди и след него (плътната линия на фигура 4). Чувствителната селективност на фокалната равнина също е принципът на определяне на посоката на височината на конфокалния микроскоп и разширяване на фокалната дълбочина. Обратно, обикновените оптични микроскопи нямат очевидни промени в яркостта преди и след позицията на фокуса
6. Висок контраст, висока резолюция
В обикновените оптични микроскопи, поради интерференцията на отразената светлина от фокусната част, тя се припокрива с частта за фокусно изображение, което води до намаляване на контраста на изображението. От друга страна, в конфокалната оптична система, разсеяната светлина извън фокусната точка и разсеяната светлина вътре в лещата на обектива са почти напълно премахнати, така че може да се получи изображение с много висок контраст. Освен това, тъй като светлината преминава през лещата на обектива два пъти, точковият образ първо се изостря, което също подобрява разделителната способност на микроскопа.
7. Функция за оптична локализация
В конфокалната оптична система отразената светлина, различна от съвпадащата точка с фокусната точка, се екранира от микропората. Следователно, когато се наблюдава триизмерна проба, се формира изображение, сякаш пробата е нарязана с фокалната равнина. Този ефект е известен като оптична локализация и е една от особеностите на конфокалните оптични системи.
8. Функция за мобилна памет на фокус
Така наречената отразена светлина извън фокусната точка е екранирана от микропорите. От друга страна, може да се счита, че всички точки на изображението, образувано от конфокалната оптична система, съвпадат с фокусната точка. Следователно, ако триизмерната проба се премести по Z-ос (оптична ос), изображенията се натрупват и съхраняват в паметта и накрая ще се получи изображението, образувано от цялата проба и фокусната точка. Функцията за безкрайно задълбочаване на дълбочината на фокуса по този начин се нарича функция на мобилната памет.
9. Функция за измерване на формата на повърхността
По отношение на функцията за изместване на фокуса, повърхностната форма на пробата може да бъде измерена безконтактно чрез добавяне на верига за запис на повърхностна височина. Въз основа на тази функция е възможно да се запишат координатите на Z-ос, образувани от максималната стойност на осветеност във всеки пиксел, и въз основа на тази информация може да се получи информация, свързана с формата на повърхността на пробата.
10. Функция за измерване на микроразмери с висока точност
Устройството за приемане на светлина използва 1-размерен CCD сензор за изображения, така че не се влияе от наклона на сканиране на сканиращото устройство, така че да може да се извърши измерване с висока точност. В допълнение, поради използването на функцията за памет за изместване на фокуса с регулируема дълбочина на фокуса (задълбочаване), грешката на измерване, причинена от изместването на фокуса, може да бъде елиминирана.
11. Анализ на триизмерно изображение
Използвайки функцията за измерване на формата на повърхността, можете лесно да създадете триизмерно изображение на повърхността на пробата. Не само това, но също така може да извършва различни анализи като: измерване на грапавостта на повърхността, площ, обем, повърхностна площ, кръглост, радиус, максимална дължина, периметър, център на тежестта, томографско изображение, FFT трансформация, измерване на ширината на линията и т.н. .
Лазерният конфокален сканиращ микроскоп може да се използва не само за наблюдение на клетъчната морфология, но и за количествен анализ на вътреклетъчни биохимични компоненти, статистика на оптичната плътност и измерване на клетъчната морфология.
