Има два типа флуоресцентни микроскопи въз основа на техните светлинни пътища:
1. Трансмисионен флуоресцентен микроскоп: Източникът на възбуждаща светлина се използва за възбуждане на флуоресценция чрез преминаване през материала на пробата през кондензаторна леща. Могат също да се използват често използвани концентратори на тъмно поле и обикновени концентратори могат да се използват за регулиране на рефлектора за пренасочване и странично насочване на възбуждащата светлина към образеца. Това е сравнително старомоден флуоресцентен микроскоп. Предимството му е силната флуоресценция при ниско увеличение, но недостатъкът му е, че флуоресценцията му намалява с увеличаване на увеличението. Поради това е по-добре да се наблюдават материали с по-големи проби.
2. Флуоресцентният микроскоп с падаща светлина е нов тип флуоресцентен микроскоп, разработен в съвремието. За разлика от горното, възбуждащата светлина пада от лещата на обектива надолу върху повърхността на образеца, като се използва същата леща на обектива като осветителния кондензатор и лещата на обектива за събиране на флуоресценция. Трябва да се добави двуцветен разделител на лъча към оптичния път, който е на 45 градуса от светлия уран. Ъгъл, възбуждащата светлина се отразява в лещата на обектива и се фокусира върху пробата. Флуоресценцията, генерирана от пробата, както и възбуждащата светлина, отразена от повърхността на лещата на обектива и покривното стъкло, навлизат в лещата на обектива и се връщат към двуцветния разделител на лъча, разделяйки възбуждащата светлина и флуоресценцията. След това остатъчната възбуждаща светлина се абсорбира от блокиращия филтър. Ако се използват различни комбинации от възбуждащи филтри/двуцветни сепаратори на лъчи/блокиращи филтри, те могат да отговорят на нуждите от различни флуоресцентни реакционни продукти. Предимствата на този флуоресцентен микроскоп са равномерно осветяване на полето, ясно изображение и по-силна флуоресценция с по-голямо увеличение.
Инструкции за използване на флуоресцентен микроскоп
1. Включете източника на светлина. Живачната лампа със свръхвисоко налягане трябва да се загрее предварително за няколко минути, за да достигне максималната си яркост.
2. Трансмисионната флуоресцентна микроскопия изисква инсталирането на необходимия филтър за възбуждане между източника на лампата и кондензатора и съответния блокиращ филтър зад лещата на обектива. Флуоресцентният микроскоп с падаща светлина трябва да постави необходимия филтър за възбуждане/двоен цветен разделител на лъча/блокиращ филтърен блок в слота на оптичния път.
3. Наблюдавайте с микроскоп с ниска мощност и регулирайте центъра на светлинния източник според устройството за регулиране на различните видове флуоресцентни микроскопи, така че да се намира в центъра на цялото осветително петно.
4. Поставете образеца и го фокусирайте за наблюдение. Трябва да се обърне внимание по време на употреба: Не наблюдавайте директно с очите си, преди да инсталирате филтъра, за да избегнете увреждане на очите; Когато се наблюдават проби с маслен микроскоп, трябва да се използва специален нефлуоресцентен маслен микроскоп; След като живачната лампа с високо налягане е изключена, тя не може да бъде незабавно включена отново. Рестартирането отнема 5 минути, в противен случай ще бъде нестабилно и ще повлияе на живота на живачната лампа.
(3) Наблюдавайки под флуоресцентен микроскоп на учебна платформа, използвайки синьо-виолетов светлинен филтър, могат да се видят клетки, оцветени с 0.01% акридиново оранжево флуоресцентно багрило. Ядрото и цитоплазмата са възбудени да произведат два различни цвята флуоресценция (тъмнозелено и оранжево червено).
