Ролята на всеки филтър във флуоресцентната микроскопия
Най-важният проблем при флуоресцентната микроскопия е комбинацията от филтри и както филтърът за възбуждане, така и филтърът за екраниране трябва да са подходящи за наблюдаваното флуоресцентно тяло и да съвпадат един с друг. За определени специфични цели, ако има грешка при избора на филтър, това може да доведе до недоразумения и дори неправилни резултати. Постиженията на технологията на флуоресцентната микроскопия и използването на висококачествени филтри и гениални филтърни групи са неразделни. Има няколко вида филтри за флуоресцентна микроскопия.
1. Топлинно поглъщащ филтър
Топлинно поглъщащият филтър е необходим филтър за предотвратяване на топлинното излъчване в спектъра на светлинния източник от увреждане на групата оптични устройства. Ранните усъвършенствани микроскопи са били оборудвани с бутилки с барабанна форма, които могат да задържат дестилирана вода като устройства за поглъщане на топлина. Съвременните широкомащабни изследователски микроскопи са оборудвани със стъклени топлопоглъщащи филтри в светлинни кутии или камери на светлинен източник, които са прозрачни, леко жълти стъклени листове. Филтрите KG1 (2 mm) и BG38 (4 mm) на Leitz могат да пропускат почти всички спектри на ултравиолетова и видима светлина, което ги прави филтри със светлинен поток до 98%. Той абсорбира само селективно инфрачервени фототермични радиационни линии.
2. Филтър за възбуждане
Възбуждащите филтри могат селективно да абсорбират спектрални линии с дълга дължина на вълната и да пропускат само ултравиолетова светлина. Филтрите за лилава, синя и зелена светлина са филтри за възбуждане. Zeiss, Reichert, Olympus B-series, G-series, BG series, Shott UG series, Opton H, G, BP series, Leitz BP series и други филтри са всички филтри за възбуждане.
3. Блокиращ филтър
Блокиращият филтър е филтър, който селективно абсорбира спектрални линии с къса дължина на вълната и инфрачервено лъчение, позволявайки на наблюдателя да види флуоресценцията, излъчвана от обекта, който се тества, като същевременно предпазва роговицата от UV увреждане.
4. Цветен филтър за разделяне на светлина
Филтърът за разделяне на цветна светлина е филтър, който отразява възбуждащата светлина върху обекта, който се тества, карайки обекта да излъчва флуоресценция и след това предава флуоресценцията към окуляра. Този тип филтър може да се използва само в концентратори на падащ лъч, докато флуоресцентната микроскопия с предавателна светлина не изисква разделяне на цветовете.
5. Филтър за смущения
Интерферентният филтър е вид високоефективен филтър за възбуждане. Това е филтър, направен чрез подреждане на няколко тънки метални филма между два полирани стъклени листа. Коефициентът на пречупване на всеки тънък метален филм е различен, така че спектралните линии с различни дължини на вълната на източника на осветителна светлина се отразяват многократно върху всеки метален филм, което води до отмяна на някои дължини на вълните на спектралните линии поради разрушителна интерференция, докато други се подсилват от адитивни смущения и предавани през. Това води до филтър с тесен спектър на предаване, ширина на половин пик от само 6~20nm и пропускливост от 60%~70%.
