Принципът и структурните характеристики на флуоресцентната микроскопия
Флуоресцентната микроскопия използва точка с висока светлинна ефективност за излъчване на светлина с определена дължина на вълната (като ултравиолетова светлина 3650 in или виолетова синя светлина 4200 in) чрез система за филтриране на цветовете като възбуждаща светлина и възбужда флуоресцентните вещества в пробата да излъчват различни цветове на флуоресценцията. След това се наблюдава чрез увеличение на обектива и окуляра. По този начин е лесно да се разпознае дори когато флуоресценцията е много слаба на силен фон, с висока чувствителност. Използва се главно за изследване на клетъчната структура и функция, както и химичния състав. Основната структура на флуоресцентния микроскоп се състои от обикновен оптичен микроскоп плюс аксесоари като източник на флуоресцентна светлина, възбуждащ филтър, разделител на дихроичен лъч и блокиращ филтър. Флуоресцентните източници на светлина обикновено използват живачни лампи със свръхвисоко налягане (50-200W), които могат да излъчват светлина с различни дължини на вълната. Всяко флуоресцентно вещество обаче има дължина на вълната на възбуждащата светлина, която произвежда най-силната флуоресценция, така че трябва да се добавят възбуждащи филтри (обикновено ултравиолетови, лилави, сини и зелени възбуждащи филтри), за да се позволи само на определена дължина на вълната на възбуждащата светлина да проникне и да облъчи образец, като същевременно поглъща цялата останала светлина. След като бъде облъчено от възбуждаща светлина, всяко вещество излъчва видима флуоресценция, по-дълга от дължината на вълната на облъчване за много кратко време. Флуоресценцията има специфичност и обикновено е по-слаба от възбуждащата светлина. За да се наблюдава специфична флуоресценция, е необходимо да се добави блокиране (или потискане) зад лещата на обектива и да се използва в комбинация.
Разлика между флуоресцентен микроскоп и обикновен микроскоп
1. Методът на осветяване обикновено е тип падащ лъч, при който източникът на светлина се проектира върху пробата през обективна леща;
2. Източникът на светлина е ултравиолетова светлина, с по-къса дължина на вълната и по-висока разделителна способност от обикновените микроскопи;
3.Има два специални филтъра, единият пред източника на светлина се използва за филтриране на видимата светлина, а този между окуляра и лещата на обектива се използва за филтриране на ултравиолетовите лъчи за защита на човешкото око.
Флуоресцентната микроскопия също е вид оптична микроскопия, като основната разлика е в различните дължини на вълните на възбуждане. Това определя разликите в структурата и употребата между флуоресцентната микроскопия и обикновената оптична микроскопия.
Флуоресцентната микроскопия е основен инструмент за имунофлуоресцентна цитохимия. Състои се от основни компоненти като източник на светлина, система от филтърни плочи и оптична система. Той използва определена дължина на вълната на светлината, за да възбуди пробата да излъчва флуоресценция, и я увеличава чрез система от обективни лещи и окуляри, за да наблюдава флуоресцентното изображение на пробата.
