Основите и структурните елементи на флуоресцентния микроскоп
Флуоресцентната микроскопия използва точка с висока светлинна ефективност, за да излъчва светлина с определена дължина на вълната (като ултравиолетова светлина 3650 in или лилаво синя светлина 4200 in) през филтърната система като възбуждаща светлина, за да възбуди флуоресцентните вещества в образеца да излъчват флуоресценция на различни цветове След това наблюдавайте през увеличението на обектива и окуляра. По този начин, при силен контрастен фон, дори ако флуоресценцията е много слаба, той е лесен за идентифициране и има висока чувствителност. Използва се главно за изследване на клетъчна структура и функция и химичен състав. Основната структура на флуоресцентния микроскоп се състои от обикновен оптичен микроскоп плюс някои аксесоари (като източник на флуоресцентна светлина, възбуждащ филтър, двуцветен разделител на лъча и блокиращ филтър и др.). Флуоресцентен източник на светлина – обикновено използвайте живачна лампа с ултрависоко налягане (50-200W), която може да излъчва светлина с различни дължини на вълната, но всяко флуоресцентно вещество има дължина на вълната на възбуждане, която произвежда най-силната флуоресценция, така че филтър за възбуждане (Общо взето, има ултравиолетови, лилави, сини и зелени филтри за възбуждане), които позволяват само на възбуждаща светлина с определена дължина на вълната да премине през и да облъчи образеца, докато абсорбира друга светлина. След като всяко вещество бъде облъчено от възбуждаща светлина, то излъчва видима флуоресценция с по-голяма дължина на вълната от дължината на вълната на облъчване за много кратко време. Флуоресценцията е специфична и обикновено по-слаба от възбуждащата светлина. За да се наблюдава специфична флуоресценция, трябва да се добави блокиране (или потискане) зад лещата на обектива и да се използва заедно с нея.
Разликата между флуоресцентния микроскоп и обикновения микроскоп
1. Методът на осветяване обикновено е епископичен, т.е. източникът на светлина се проектира върху пробата през лещата на обектива;
2. Източникът на светлина е ултравиолетова светлина, дължината на вълната е по-къса и разделителната способност е по-висока от тази на обикновените микроскопи;
3. Има два специални филтъра, единият пред източника на светлина се използва за филтриране на видимата светлина, а този между окуляра и обектива се използва за филтриране на ултравиолетовите лъчи за защита на човешкото око.
Флуоресцентният микроскоп също е вид оптичен микроскоп, основната разлика е, че дължината на вълната на възбуждане на двете е различна. Това определя разликата между флуоресцентния микроскоп и обикновения оптичен микроскоп по отношение на структурата и употребата.
Флуоресцентната микроскопия е важен инструмент в имунофлуоресцентната цитохимия. Състои се от основни компоненти като източник на светлина, система от филтърни плочи и оптична система. Това е да се използва определена дължина на вълната на светлината, за да се възбуди образецът да излъчва флуоресценция и да се наблюдава флуоресцентното изображение на образеца чрез усилване на лещата на обектива и системата на окуляра.
