Връзка между общото увеличение и разделителната способност в микроскопията за потапяне на масло
Целите на микроскопите, използвани в микробиологичните изследвания, обикновено са три типа: ниско увеличение (1 {{2 0}} x), високо увеличение (4 0 x) и увеличение на маслото (100x). Има и думата „OI“ (потапяне на масло), показваща, че тя има най -голямо увеличение сред трите. В зависимост от увеличението на използвания окуляр, обектът, който се проверява, може да бъде увеличен 1000-1600 пъти. Когато се използва, разликата между лещата за потапяне на масло и други цели е, че няма слой въздух между стъклената пързалка и обективния обектив, а слой масло, наречено система за потапяне на масло. Този тип масло често се избира като кедрово масло, тъй като неговият коефициент на пречупване n =1. 52, което е същото като стъклото. Когато светлината преминава през стъклен плъзгач, тя може директно да влезе в обективния обектив през кедрово масло без пречупване. Ако средата между стъклената пързалка и обективната леща е въздух, тя се нарича суха система. Когато светлината преминава през стъклената пързалка, тя се пречупва и разпръсква, а количеството светлина, влизаща в обективната леща, очевидно се намалява, което намалява осветяването на зрителното поле. Използването на маслени огледала не само увеличава осветлението, но също така увеличава главно числената бленда, тъй като ефективността на увеличение на микроскоп се определя от числената му бленда. Така наречената числова бленда се отнася до продукта на половината синус от максималния ъгъл, при който светлината се прожектира върху обективната леща (известна като ъгъла на лещата), умножена по коефициента на пречупване на средата между стъкления слайд и обективната леща. Тя може да бъде изразена по следната формула: na=n × sin a, където na=числова бленда; N=показател на пречупване на средата; A=Половината от максималния ъгъл на инцидента, т.е. половината от ъгъла на огледалото. Следователно, колкото по -голям е ъгълът, при който светлината се проектира върху обективния обектив, толкова по -голяма е ефективността на микроскопа, а размерът на този ъгъл зависи от диаметъра и фокусното разстояние на обективния обектив. Междувременно теоретичната граница на A е 90 .. sin90. Ако ъгълът на инцидента на светлината е 120o, а половината от синуса му е sin60o =0. 87, тогава: когато използвате въздух като среда: na =1 × 0. 87=0. 87; Когато използвате водата като средата: na =1. 33 × 0. 87=1. 15; При използване на асфалт като среда: na =1. 52 × 0. 87=1. 32. Разделителната способност на микроскоп се отнася до способността му да различава минималното разстояние между две точки. Той е пряко пропорционален на числената бленда на обективната леща и обратно пропорционална на дължината на вълната. Следователно, колкото по -голяма е числената бленда на обективната леща, толкова по -къса е дължината на вълната на светлинната вълна, толкова по -голяма е разделителната способност на микроскопа и толкова по -ясна може да се разграничи фината структура на обекта, който се проверява.
Следователно, колкото по -голяма е числената бленда на обективната леща, толкова по -къса е дължината на вълната на светлинната вълна, толкова по -голяма е разделителната способност на микроскопа и толкова по -ясна може да се разграничи фината структура на обекта, който се проверява. Следователно, високата разделителна способност означава малко отличимо разстояние и тези два фактора са обратно пропорционални. Някои хора обикновено описват разделителната способност като колко микрометри или нанометри е това, което всъщност обърква разделителната способност с минималната разделителна способност. Разделителната способност на микроскоп е представена от минималното разстояние, което може да бъде разрешено. Минималното разстояние, което може да прави разлика между две точки, е λ/2NA, където λ=дължина на вълната на светлинната вълна. Средната дължина на светлинната вълна, която може да бъде възприета от просто око, е 0. 55 μ m. Ако числовата бленда е 0. 65 за обективен обектив с висока мощност, тя може да различи разстоянието между две точки като 0. 42 μm. Въпреки това, разстоянието между две точки под 0. 42 μm не може да бъде разграничено, дори ако се използва по -голям окуляр за увеличение за увеличаване на цялостното увеличение на микроскопа. Само чрез използване на по -голям обективен обектив с по -голяма числена бленда може да се увеличи нейната разделителна способност. Например, когато използвате огледало за масло с числова бленда от 1,25, минималното разстояние между две точки, които могат да бъдат разграничени, е 0. 55/(2 × 1.25) =0. 22 μ m. Следователно, можем да видим, че ако обектив с висока мощност с увеличение 4 0 пъти (Na =0. 65) и окуляр с увеличение 24 пъти се използва, въпреки че общото увеличение е 96 {{33} пъти, минималното разстояние на разделителната способност е само 0,42 µm. Ако масленото огледало с увеличение 90 пъти (Na =1. 25) и се използва окуляр с увеличение 9 пъти, въпреки че общото увеличение е 810 пъти, разстояние от 0,22 μm може да се разграничи.
