Предварителен преглед и настройка на флуоресцентна микроскопия:
(1) Преди всяко наблюдение на флуоресценцията е необходимо рутинно да се проверяват подравняването на нажежаемата жичка, фокусирането на оптичния път, апертурата на апертурата и настройките на апертурата на зрителното поле на флуоресцентното устройство.
(2) Дали необходимите филтърни компоненти за възбуждане/емисия на флуоресценция са инсталирани в преобразувателя, дали обективът на флуоресцентния микроскоп е конфигуриран правилно и дали маслените петна и прахът пред лещата на обектива са отстранени.
(3) По същия начин, когато се наблюдава разликата в пропуснатата светлина, е необходимо да се провери конюгирането на фокусиращата леща към центъра и контрастния пръстен към лещата на обектива.
(4) Проверете дали има някаква течност или прах, висящи по носителя на пробата (предметно стъкло, покривно стъкло и други съдове) и дали дебелината е в диапазона на работното разстояние, калибриран от лещата на обектива. Нарязаните проби не трябва да са прекалено дебели, препоръчва се приблизително По-малко или равно на 10 μm.
(5) Поради наличието на ултравиолетови лъчи в източника на светлина, над платформата за товарене трябва да се постави кафяв сенник, за да се предотврати UV увреждане на ретината.
(6) Нестабилното напрежение може да намали експлоатационния живот на високоволтовите живачни лампи и трябва да се добави регулатор на напрежението към захранващия източник на светлина.
(7) За да се удължи живота на живачната лампа, тя може да се изключи само 15 минути след включването; След като флуоресцентното захранване на живачната лампа бъде изключено, тя трябва да изчака поне 10 минути, за да охлади живачните пари обратно до първоначалното си състояние при рестартиране, в противен случай това ще повлияе на живота на лампата.
Наблюдение на изображения с флуоресцентен микроскоп:
(1) След включване на източника на флуоресцентна лампа за около 5-10 минути, интензитетът на възбуждане има тенденция да се стабилизира и пробата се зарежда за наблюдение; За да се предотврати прекомерното възбуждане на светлина по време на фокусиране и търсене на изображения от причиняване на гасене на флуоресценцията на пробата, отворът на флуоресцентния микроскоп първо се намалява или се добавя ND филтър, за да се регулира възбуждането до умерен интензитет, и етапът на пробата се премества редовно. След определяне на огледалния образ, той се настройва към състояние на флуоресценция за запис.
(2) Корекции с лошо качество на изображението. Необходимите мерки за коригиране, които могат да бъдат предприети, с изключение на факторите за подготовка на пробата, са:
① Изключете засенчващи или ограничаващи устройства в оптичния път на изображението, като аксесоари за DIC, ND филтри и др.
② Регулирайте отново фокусирането и отвора на блендата на колектора на флуоресцентния микроскоп.
③ Регулирайте внимателно пръстена за коригиране на покритието на обектива на флуоресцентния микроскоп.
