Методи за подготовка на проби за оптична и електронна микроскопия на филми
Методът на микрофилмиране обикновено включва четири категории: метод на разделяне, метод на цялостно запечатване, метод на покритие и метод на пресоване.
①Метод на парче. Дебелината на среза на оптичния микроскоп е между 2 и 25 микрона, общи растителни и животински материали, срезът е с дебелина около 10 микрона. Методът на разделяне варира в зависимост от различните агенти за вграждане. Често използвани са методът на разделяне с парафин, методът на разделяне с памучно лепило, методът на замразено разделяне и методът на гликол метакрилат (наричан метод GMA). Методът на разделяне на парафин включва стъпките на фиксиране, вграждане, разделяне, оцветяване, дехидратация и запечатване. Ключът е да вградите биоматериала в парафинов восък и да използвате парафинов восък като опора, за да нарежете биоматериала, потопен във восъчния блок, на идеални тънки резени. Операционният процес е както следва: фиксация → измиване с вода → стъпка по стъпка от ниска към висока концентрация на дехидратация на алкохол → прозрачност на ксилен → потапяне с восък → вграждане → разделяне → кръпка → депарафинизиране с ксилен → стъпка по стъпка от висока към ниска концентрация третиране с алкохол и накрая преминаване към вода → оцветяване → стъпка по стъпка от дехидратация на алкохол с ниска към висока концентрация → прозрачност на ксилен → запечатване с лепило от смола. Основните включени стъпки са еднакви при всички видове техники за правене на филми.
② Интегрален метод на запечатване. Използва се за единични клетки, малки организми или разпръснати органи на метода на целия монтиран филм. Този метод също така изисква различни стъпки на фиксиране, оцветяване, дехидратация, прозрачност и запечатване. Този метод се използва за приготвяне на устния апарат на дантели и насекоми.
Метод на намазка. Метод за приготвяне, при който лесно диспергиран биологичен образец се нанася върху предметно стъкло. Кръвна цитонамазка е пример.
④Метод на пресоване. Естествените, лесно диспергиращи се тъкани или лесно диспергиращи се тъкани след третиране, като животински сперматоцити, клетки от върха на корена и т.н. върху предметното стъкло, плюс покривно стъкло, и след това силно смачкване на тъканите, така че клетките или вътреклетъчните структури да се разпространят в слой на методите на заснемане. Методът на пресата често се използва за наблюдение на хромозоми, обикновено оцветени с пурпурен ацетат, лишей червено и червено карболова киселина.
