Основна работа на флуоресцентния микроскоп
а. Изключете осветлението в стаята и включете живачната лампа на микроскопа;
b. Изберете съответния филтър според флуоресцеина, маркиран от пробата;
° С. Поставете пробата и намерете подходящо зрително поле;
д. Ако трябва да правите снимки, моля, потвърдете, че цветният филм е инсталиран във фотоапарата;
д. Включете устройството за селфи, изберете ръчна предавка, обикновено скоростта на снимане е в рамките на 0.5-10 секунди;
f. След употреба изключете цялото захранване и запишете употребата. на
на
3. Метод за запис на флуоресцентно изображение
Флуоресцентното изображение, наблюдавано от флуоресцентния микроскоп, има както морфологични характеристики, така и флуоресцентен цвят и яркост. Когато се оценяват резултатите, двете трябва да се комбинират за цялостна преценка. Резултатите се записват въз основа на субективни показатели, тоест визуално наблюдение от работниците. Като цяло качествено наблюдение, основно надеждно. С развитието на технологиите и науката се използват обективни индикатори за записване на резултатите от преценката в различна степен, като клетъчни спектрофотометри, анализатори на изображения и други инструменти. Въпреки това, резултатите, записани от тези инструменти, също трябва да се комбинират със субективни преценки. на
Фотографирането с флуоресцентен микроскоп е много необходимо за записване на флуоресцентни изображения. Тъй като флуоресценцията лесно избледнява и отслабва, е необходимо резултатите да се записват в реално време. Методът е по същество същият като този на обикновената микрофотография. Просто трябва да използвате високоскоростен фоточувствителен филм. Тъй като ултравиолетовата светлина има силен ефект върху потушаването на флуоресценцията, като FITC маркери, яркостта на флуоресценцията ще намалее с 50 процента, когато се облъчва с ултравиолетова светлина за 30 секунди. Следователно, ако скоростта на експониране е твърде ниска, флуоресцентното изображение не може да бъде направено. Флуоресцентните микроскопи за общо изследване имат полуавтоматични или напълно автоматични фотомикрографски системни устройства. на
на
4. Предпазни мерки при използване на флуоресцентна микроскопия
а. Работете стриктно в съответствие с изискванията на фабричните инструкции за флуоресцентен микроскоп и не променяйте програмата по желание. на
b. Проверката трябва да се извърши в тъмна стая. След като влезете в тъмната стая, свържете захранването и запалете живачната лампа със свръхвисоко налягане за 5-15 минути. След като силната светлина от източника на светлина е стабилна, очите са напълно адаптирани към тъмната стая и след това започват да наблюдават образеца. на
° С. За да предотвратите увреждането на очите от ултравиолетовите лъчи, носете защитни очила, когато регулирате източника на светлина. на
д. Времето за проверка за предпочитане е 1-2 часа всеки път. Ако надхвърли 90 минути, светлинният интензитет на живачната лампа със свръхвисоко налягане постепенно ще намалее и флуоресценцията ще отслабне; след като пробата бъде облъчена с ултравиолетова светлина за 3-5 минути, флуоресценцията също ще бъде значително отслабена; следователно не трябва да надвишава най-много 2-3 часа. . на
д. Животът на светлинния източник на флуоресцентен микроскоп е ограничен и пробите трябва да се проверяват централно, за да се спести време и да се защити светлинният източник. Когато времето е горещо, трябва да се добавят вентилатори за разсейване на топлината, а новите крушки трябва да се записват от началото на времето им на използване. Когато искате да я използвате отново, след като лампата е изгаснала, трябва да изчакате, докато крушката се охлади достатъчно, преди да я запалите. Избягвайте да запалвате източника на светлина няколко пъти на ден. на
f. Наблюдавайте пробата веднага след оцветяването, тъй като флуоресценцията постепенно ще отслабне с времето. Ако пробата се съхранява в полиетиленов пластмасов плик при 4 градуса, времето за отслабване на флуоресценцията може да се забави и може да се предотврати изпаряването на монтиращия агент. на
ж. Стандарт за оценка на яркостта на флуоресценцията: обикновено се разделя на четири нива, т.е. "-" означава, че не може да се види флуоресценция или е слаба. "плюс" означава, че се наблюдава само ясно видима флуоресценция. "плюс плюс" означава, че се вижда ярка флуоресценция. "плюс плюс плюс" означава видима ярка флуоресценция.
