Експериментални стъпки на метод за директно броене на микроорганизми под микроскоп
1. Разрешаване
Разрелете суспензията на варенето на мая по подходящ начин. Ако бактериалният разтвор не е концентриран, той не е необходимо да се разрежда.
2. Стая за броене на огледало
Преди да добавите проби, проведете микроскопично изследване на камерата за броене на броя на борда. Ако има мръсотия, тя трябва да бъде почистена преди броене.
3. Добавете проби
Покрийте чистия и сухи кръвни клетки, броене на клетъчни с покривно стъкло и след това използвайте стерилна фина уста, за да пуснете малка капчица (не твърде много) от разредена течност за пивоварна дрожди от ръба на стъклото на покритието, което позволява на бактериалната течност да влезе в помещението за броене през капиларното проникване по протежение на празнината. Като цяло помещението за броене може да се напълни с бактериална течност. Внимавайте да не произвеждате мехурчета.
4. Отброяване на микроскоп
След като стоите неподвижно в продължение на 5 минути, поставете плаката за преброяване на кръвните клетки на етапа на микроскоп, първо използвайте микроскоп с ниска мощност, за да намерите камерата за броене и след това преминете към микроскоп с висока мощност за броене. Ако се установи, че бактериалният разтвор е твърде концентриран или твърде разреден преди броене, разреждането трябва да се коригира преди да се брои. Общото изискване за разреждане на пробата е около 5-10 бактериални клетки на малка мрежа. Изберете 5 клетки от всяка стая за броене (по избор 4 ъгъла и централни клетки) за броене. Бактериалните клетки, разположени на линията на мрежата, обикновено се броят само на горната и дясната линия. Когато дрождите покълват и размерът на пъпката достигне половината от майчината клетка, се вземат два бактериални броя. Преброяването на проба изисква получаване на стойности от две камери за броене, за да се изчисли съдържанието на бактериите в пробата.
5. Почистете хемоцитометъра
След употреба изплакнете хемоцитометъра с воден стълб върху крана. Не мийте с твърди предмети. След измиване, въздухът изсъхне или издухайте със сешоар. Микроскопично изследване, наблюдавайте дали във всяка малка клетка има остатъчни бактерии или друга утайка. Ако не е чист, той трябва да се измие многократно, докато не бъде чист.
