Биологичен микроскоп върху обема на тъканния блок
Биологичен микроскоп с кондензатор може да движи кондензатора нагоре и надолу, за да направи яркостта му умерена, а също така може да промени апертурата на анализатора на променлива светлина, за да постигне умерена яркост от 9b. Ако светлината е на слънце, кондензаторът може да бъде повдигнат по подходящ начин и апертурата на променливия оптичен шум може да бъде увеличена по подходящ начин. Ако светлината е твърде силна, кондензаторът може да бъде намален по подходящ начин и апертурата на пресечната точка може да бъде намалена по подходящ начин. Ако все още се чувствате ослепителни в този случай, можете да изберете подходящ филтър и да го поставите на скобата под кондензатора. Тази туса може да получи яркост, която ви удовлетворява. Разбира се, необходимо е да се натрупа опит след известен период на практика в регулирането на горната и долната позиция на кондензатора, за да се промени размерът на апертурата на оптичното отчитане и да се изберат подходящи филтри.
Много важен проблем на биомикроскопа е, че съдържанието на 65 елемента във всяка част след сушене чрез замразяване и вграждане на смола (FD) и сушене чрез замразяване трябва да се обработва внимателно, за да не се повредят клетките, които ще се наблюдават и анализират. Тъй като рентгеновият микроанализ не само включва много стъпки, но и струва много, е много жалко да се направи грешно заключение, ако анализираните клетки са увредени клетки или мъртви клетки след дългосрочно и многоетапно лечение. Например миокардните клетки, разделени чрез третиране с колагеназа, имат две форми, едната е дълга пръчка, а другата е кръгла. Последната е умираща клетка, която се уврежда по време на отделянето на клетките.
Съдържанието и разпределението на електролитите в тези два вида клетки са много различни под биологичен микроскоп. Na е много високо и K е много ниско в кръглите миокардни клетки, а концентрацията на Ca в линейните дендрити е много висока. В сравнение с други аналитични методи е доказано, че високото Na и ниското K в кръговите клетки и високото ca в митохондриите са резултат от увреждане на клетъчната мембрана по време на клетъчното разделяне. Методът на студена фиксация на клетки и тъкани често е да се фиксират първо чрез охлаждане и след това да се съхраняват в течен азот. Охлаждащата фиксация е много важна за консервиращия ефект. Живите клетки или свежите тъкани са богати на вода. При охлаждане често частите от клетките или тъканите, които са в пряк контакт с криопротекторите (особено при охлаждане с течен азот), първо се замразяват и фиксират, като по този начин се образува "обвивка", която пречи на замразяването и фиксирането на централната част от клетките. Ето защо, когато се прави рентгенов микроанализ, често се установява, че в центъра на по-големите клетки има ледени кристали. За да се предотврати това, като охлаждащ агент се използва вещество с точка на топене, по-висока от тази на течния азот, но температура на сушене, по-ниска от 806C. Има много такива вещества, но най-лесно достъпното е концентрираният пропан (точка на кипене-42．120c, точка на топене-187．10c, молекулно тегло-44.1), който има най-бърза скорост на охлаждане. Но неговият недостатък е запалимостта.
Биологичният микроскоп може да постави мускулното влакно върху специална рамка и когато мускулното влакно се свие до определена фаза и трябва да бъде фиксирано, дюзата се стартира незабавно, така че течният пропан да се напръска върху мускулното влакно, за да охлади и фиксира то. След това мускулните влакна се изваждат заедно със стелажа и се поставят в течен азот. Ако кръвните клетки или отделените клетки са фиксирани, първо центрофугирайте на ниска скорост, за да концентрирате клетките, прехвърлете клетките в сребърна малка епруветка с добра топлопроводимост и поставете малката епруветка в течен пропан за замразяване и фиксиране. При фиксиране на панкреаса на плъхове в лабораторията на Хол, два стоманени блока бяха предварително охладени с течен хелий (или течен азот), а два медни блока бяха поставени пред и зад панкреаса с клещи, така че лелите да бъдат закалени и фиксирани. Тъкани или клетки могат да се съхраняват дълго време след охлаждане и фиксиране и прехвърляне в течен азот.
