Ръководство за предимствата и недостатъците на многофотонните лазерни сканиращи микроскопи
1. Възбудено от червена или инфрачервена светлина, разсейването на светлината е малко, а разсейването на малки частици е обратно пропорционално на четвъртата степен на дължината на вълната.
2. Повече разпръснати фотони от напречното-сечение на изображението могат да бъдат събрани без необходимост от дупки.
3. Пиндупките не могат да различат разпръснатите фотони, излъчвани от разфокусирани или фокални зони, а мултифотоните имат по-добро съотношение сигнал-към-шум при дълбоки изображения.
4. Ултравиолетовата или видимата светлина, използвана за възбуждане на единичен фотон, лесно се абсорбира и отслабва от пробата, преди лъчът да достигне фокалната равнина, което затруднява възбуждането на дълбоки слоеве.
5. По отношение на наблюдението с биологична микроскопия, първото съображение е да не се уврежда активното състояние на самия организъм, да се поддържа циркулацията на водата, концентрацията на йони, кислород и хранителни вещества. В областта на наблюдението на светлината както топлинната, така и фотонната енергия трябва да останат в рамките на дозата на облъчване и светлинната енергия, които не увреждат клетките.
6. Многофотонната микроскопия има много предимства. По отношение на три{2}}измерна разделителна способност, проникване в дълбочина, ефективност на разсейване, фонова светлина, съотношение-към-шум, контрол и т.н., има характеристики, които предишните лазерни микроскопи не притежават или не могат да надминат
Недостатъци на многофотонния лазерен сканиращ микроскоп:
1. Само за флуоресцентни изображения.
2. Ако пробата включва хромофори, които могат да абсорбират възбуждаща светлина, пробата може да бъде подложена на термично увреждане.
3. Разделителната способност е леко намалена, въпреки че може да бъде подобрена чрез едновременно използване на конфокални малки дупки, има загуба на сигнал.
4. Поради ограниченията на скъпите свръхбързи лазери, цената на многофотонните сканиращи микроскопи е относително висока.
